T4 DNA 連接酶可催化相鄰DNA 鏈的5’-P末端和3’-OH末端以磷酸二酯鍵結(jié)合的反應(yīng),需ATP作輔酶,不僅可以催化粘性末端之間或平滑末端之間的DNA的連接,也可以催化DNA與RNA之間以及少數(shù)RNA之間的連接??蓱?yīng)用于在粘性末端或平末端連接雙鏈DNA分子,也可應(yīng)用于修補雙鏈DNA、RNA或DNA RNA雜交體上的缺口。
組分
組分名稱 D0101A(35KU) D0101B (3500KU) T4 DNA Ligase(350 U/μl) 100 μl 1 mlx10 10× Ligation Buffer 250 μl 20 ml
活性定義
在20 μl連接反應(yīng)體系、0.12 μM(300μg/ml)的5’-末端濃度條件下,16°C反應(yīng)30分鐘,能使50%HindIII消化的λDNA片段連接所需的酶量定義為一個活性單位。
應(yīng)用
PCR擴增、3’端加尾、DNA測序。
儲存
-20℃可保存1年,-80℃可保存3年,避免反復(fù)凍融。
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