描述: 活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產物過氧化物和羥化物等,參與細胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程?;钚匝鯔z測試劑盒(Reactive oxygen species assay kit)采用DCFH-DA探針檢測活性氧。DCFH-DA是迄今為止最常用、最靈敏的細胞內活性氧檢探針。本身沒有熒光的DCFH-DA可穿過細胞膜進入細胞,在胞內轉化生成DCFH。在活性氧存在的條件下,DCFH被氧化生成熒光物質DCF,綠色熒光強度與細胞內活性氧水平成正比。在激發(fā)波長502 nm,發(fā)射波長530 nm附近,使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計、熒光酶標儀、流式細胞儀等檢測DCF 熒光,從而測定細胞內活性氧水平。 DCFH-DA活性氧檢測系統(tǒng)本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。需要下列等熒光檢測設備之一:熒光顯微鏡、熒光光度計、熒光酶標儀、流式細胞儀。激發(fā)波長500 ± 15 nm,發(fā)射波長530 ± 20 nm,或者按照FITC熒光檢測條件檢測。 組成與儲存:可以測定100-500個樣品 (1) 0.1 ml 10 mM DCFH-DA in DMSO,-20 ºC保存。 (2) 1 ml活性氧陽性對照,4 ºC保存。
使用活性氧檢測試劑盒(Reactive oxygen species assay kit,#C1300)顯示CHO細胞內活性氧熒光。左圖:正常CHO細胞;右圖:CHO細胞用試劑盒配備的活性氧陽性對照處理。綠色熒光表明細胞活性氧急劇增加,并能顯示其定位。
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