描述:在實體組織和細胞內,膽固醇酯既是構成細胞質膜的成分,也是細胞內脂滴的主要組分。細胞內膽固醇過度聚集與動脈粥樣硬化泡沫細胞形成密切相關。實體組織和細胞的膽固醇測定遠比與血液膽固醇測定復雜。試劑盒避免了有毒的有機溶劑抽提、繁雜的氮氣吹干和脂質復溶等步驟,采用高效能試劑裂解細胞和提取膽固醇,優(yōu)化酶學反應和操作步驟。簡單易行,靈敏度高,線性范圍20~5000 µmol/L。 原理:采用WHO、中國《全國臨床檢驗操作規(guī)程》推薦的酶學方法,結合經(jīng)典GPO Trinder酶學反應1:(1) 膽固醇酯酶分解膽固醇酯為游離膽固醇。(2) 膽固醇氧化酶將游離膽固醇氧化。(3) 反應過程產(chǎn)生過氧化氫。(4) 在過氧化物酶催化下進行生色反應,在550nm有吸收峰,光密度值與膽固醇濃度成正比。 適于測定樣品 (1) 動物實體組織 (2) 培養(yǎng)細胞 (3) 細胞膜組分 組成 (105次微板測定或30次1 ml比色杯測定) (1) 裂解液 100 ml (2) R1試劑 16 ml (3) R2試劑 4 ml (4) 5 mmol/L膽固醇標準品0.5 ml 4 ºC,避光儲存3個月。 所需設備:酶標儀、生化分析儀或721、722型可見光分光光度計。96孔微板或比色杯光徑1cm。工作波長550nm,如無此波長建議優(yōu)先選用570nm、次選530、490nm。
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