產(chǎn)品儲(chǔ)運(yùn) GenFectin (1.0mg/ml) 在室溫下運(yùn)輸,試劑到時(shí)請(qǐng)即存放于4℃,在4℃可存放一年以上。使用前請(qǐng)輕輕搖勻。 產(chǎn)品概述 本試劑采用專利配方的陽離子聚合物為主要成分,可以與DNA形成穩(wěn)定的復(fù)合物,保護(hù)DNA免受核酸酶的降解,在增加核酸穩(wěn)定性的同時(shí), 提高轉(zhuǎn)染試劑/DNA復(fù)合體穿越細(xì)胞膜的效率,這種獨(dú)特設(shè)計(jì),顯著提高了基因轉(zhuǎn)染效率。 產(chǎn)品簡介 基因轉(zhuǎn)染需要一定的轉(zhuǎn)染試劑將帶有目的基因的載體運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi)。目前,最常用的轉(zhuǎn)染試劑是陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物,它們的特點(diǎn)和病毒類似,容易透過細(xì)胞膜。其中,陽離子脂質(zhì)體在體外基因轉(zhuǎn)染中有很高的效率,然而在體內(nèi),它迅速被血清清除,在肺組織內(nèi)累積,誘發(fā)強(qiáng)烈的抗炎反應(yīng),這將導(dǎo)致高水平的毒性,因此,在很大程度上限制了其應(yīng)用。由于陽離子脂質(zhì)體的局限性,陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑日益受到重視。 本試劑采用專利配方的陽離子聚合物為主要成分,可以與DNA形成穩(wěn)定的復(fù)合物,保護(hù)DNA免受核酸酶的降解,在增加核酸穩(wěn)定性的同時(shí), 提高轉(zhuǎn)染試劑/DNA復(fù)合體穿越細(xì)胞膜的效率,這種獨(dú)特設(shè)計(jì),顯著提高了基因轉(zhuǎn)染效率。此類試劑是目前非病毒介導(dǎo)方法中效率最高的轉(zhuǎn)染試劑(不同種類細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率可有明顯差異)。此外GenFectin不被血清清除,血清和抗生素不影響其轉(zhuǎn)染效果,轉(zhuǎn)染試劑/DNA復(fù)合物可以直接加入完全細(xì)胞培養(yǎng)基中。GenFectin的細(xì)胞毒性很小,在適宜的條件下,根據(jù)推薦用量使用GenFectin進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),細(xì)胞存活率高于90%.每一批產(chǎn)品出廠前都要對(duì)其轉(zhuǎn)染效率和毒性經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控。 注意事項(xiàng): 1. 少量使用GenFectin時(shí),可取精確量的GenFectin用無菌超純水稀釋一定倍數(shù),以便精 確取樣量。該稀釋液可在4℃保存1月左右。 2. 細(xì)胞的生長狀態(tài)是轉(zhuǎn)染效率的一個(gè)主要決定因素。在實(shí)驗(yàn)條件許可的情況下,使用高質(zhì)量的培養(yǎng)液、優(yōu)質(zhì)血清等,可能會(huì)明顯提高轉(zhuǎn)染效率。 3. GenFectin在轉(zhuǎn)染中不受血清影響,所以GenFectin/ DNA復(fù)合物能直接加到含血清的培養(yǎng)基中,但稀釋GenFectin和DNA的緩沖液不能混有血清,因?yàn)镚enFectin在制備GenFectin / DNA復(fù)合物之前可能會(huì)與血清中的蛋白質(zhì)反應(yīng),影響轉(zhuǎn)染效率。 4. 如果細(xì)胞株很敏感,孵育2-4小時(shí)后除去轉(zhuǎn)染復(fù)合物并加入含血清的新鮮培養(yǎng)基。 實(shí)驗(yàn)流程:
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