產(chǎn)品規(guī)格 （CAT#: LM1030）
LBA4404： 100μl/支
pCAMBIA2301（control vector，10ng/μl ) 10μl
保存條件(保質(zhì)期)： -80℃（12個(gè)月）
LBA4404感受態(tài)細(xì)胞基因型
Ach5 (rifR) Ti pAL4404 (strepR) Octopine
LBA4404感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品說明
LBA4404菌株為Ach5型背景，核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因rif，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的章魚堿型Ti質(zhì)粒pAL4404，此質(zhì)粒含有vir基因 (vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，pAL4404質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移)。 pAL4404型Ti質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽：strep，賦予LBA4404菌株鏈霉素抗性，適用于菸草、番茄、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。本公司生產(chǎn)的LBA4404化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA。
LBA4404感受態(tài)細(xì)胞操作方法
1. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化，處于冰水混合狀態(tài)時(shí)插入 冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA（轉(zhuǎn)化效率較高，次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量），用手撥打管底混勻，依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
3. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基，于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
（當(dāng)平板只含有50 μg/ml kan 時(shí)，28℃培養(yǎng)48 h即可；平板中同時(shí)加入50 μg/ml kan，20 μg/ml rif 時(shí)，需28℃培養(yǎng)60 h；如果使用的平板含有50 μg/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90 h）。
關(guān)鍵字： LBA4404_感受態(tài)細(xì)胞_基因_
上海聯(lián)邁生物工程有限公司（LMAI Bio)是一家經(jīng)營(yíng)生物、儀器、試劑、耗材等科研產(chǎn)品的高新技術(shù)生命科學(xué)公司，在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力， 已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的一家供應(yīng)商，代理許多國(guó)際先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診 斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。 公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó)，在同行獲得一致好評(píng)。 特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價(jià)格實(shí)惠，美國(guó)原裝進(jìn)口原代細(xì)胞，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑，氨基酸，抗生素，維他命類產(chǎn)品品種齊全，試劑耗材種類繁多。 公司的規(guī)模和產(chǎn)品種類日益擴(kuò)大和更新，我們一直秉承著代理優(yōu)質(zhì)品牌的產(chǎn)品，服務(wù)好每一位顧客，將