式中A對照為未加待檢樣品的鄰苯三酚反應(yīng)體系的吸光度（用1mL 10 mmol·L-1的鹽酸替代樣品）；A樣品為加入待檢樣品后的鄰苯三酚反應(yīng)體系的吸光度；A樣品空白為加入待檢樣品后的無鄰苯三酚的反應(yīng)體系的吸光度（用0.3mL 10 mmol·L-1的鹽酸替代鄰苯三酚溶液）。
2、注意事項
1）所用的兩個比色皿杯子必須是石英的，上面會寫著“Q”,或“S”，不得使用玻璃的，玻璃比色皿要么什么都不寫，要么寫著 “G”。
2）測定前要用100g砝碼和天平標(biāo)定所用的移液槍插上槍頭后是否精準(zhǔn)，要求誤差不超過5‰，不是5％。
3）測定大量數(shù)據(jù)前，使用者先配制10g/L的Vc，做三個平行測定，精準(zhǔn)度達到5%以內(nèi)再開始正確的測定。
4）測定時由于每個人有使用習(xí)慣和誤差，中間不得換人換槍。
二、對DPPH·的清除作用
1、樣品遇酒精不渾濁的操作
DPPH·溶液的配制：取待檢樣品l mL與120μmol·L-1的DPPH·溶液3 mL加入同一試管中，搖勻，在黑暗中放置30 min，以無水乙醇為空白，在517 nm下測定其吸光度，并按下式計算清除率：
式中A對照為未加待檢樣品的DPPH·反應(yīng)體系的吸光度(用1mL無水乙醇補充體積)；A 樣品 為加入待檢樣品后的DPPH·反應(yīng)體系的吸光度；A 樣品空白 為加入待檢 樣品后的無DPPH·的反應(yīng)體系的吸光度（用3mL無水乙醇補充體積）。
注意事項：實驗所用的兩個比色皿杯子可以石英也可是是玻璃的，但是兩個比色皿要一致。石英的，上面會寫著“Q”,或“S”；玻璃比色皿要么什么都不寫，要么寫著 “G”。 準(zhǔn)確稱取47 mg DPPH·，用無水乙醇溶解并定容至100 mL，避光保存(0～4℃)，使用時稀釋至120 μmol·L-1。
2、樣品遇到酒精大量渾濁的操作
DPPH·溶液的配制：準(zhǔn)確稱取47 mg DPPH·，用無水乙醇溶解并定容至100 mL，避光保存(0～4℃)，使用時稀釋至120 μmol·L-1。取待檢樣品l mL與120μmol·L-1的DPPH·溶液3 mL加入同一試管中，搖勻，在黑暗中放置30 min，以純水為空白，在517 nm下測定其吸光度，并按下式計算清除率：
式中A對照 為未加待檢樣品的DPPH·反應(yīng)體系的吸光度(用1mL純水補充體 積)；A 樣品 為加入待檢樣品后的DPPH·反應(yīng)體系的吸光度；A樣品空白 為加入待檢樣 品后的無DPPH·的反應(yīng)體系的吸光度（用3mL純水補充體積）。
三、對羥自由基的清除作用
利用H2O2與Fe2+混合產(chǎn)生•OH，在體系中加入水楊酸捕捉•OH并產(chǎn)生有色物質(zhì)，該物質(zhì)在510nm下有吸收。反應(yīng)體系中含8.8mmol/L H2O2 1mL、9mmol/L FeSO4 1mL、9mmol/L 水楊酸-乙醇溶液1mL，不同濃度的樣品溶液1mL。最后加H2O2啟動反應(yīng)，37℃反應(yīng)30min，以蒸餾水為參比，在510nm下測定各濃度的吸光度?？紤]到樣品本身的吸光值，以9mmol/L FeSO4 1mL、9mmol/L 水楊酸-乙醇溶液1mL，不同濃度的樣品溶液1mL和1mL蒸餾水作為樣品的本底吸收值。按下式計算•OH清除率：
A0—空白對照液的吸光度；
Ax—加入樣品溶液后的吸光度；
Ax0—不加顯色劑H2O2樣品溶液本底的吸光度。
四、總還原能力的測定
在10mL離心管中分別加入0.2mol/L pH 6.6的磷酸緩沖液2.5mL和不同濃度（2，4，6，8mg/mL）的溶液1mL，加入2.5 mL 1%鐵氰化鉀，混合均勻后于50℃反應(yīng)20min。取出后加入2.5mL 10%三氯乙酸終止反應(yīng)，5000r/min離心10min。取上清液2.5mL，加入2.5mL蒸餾水和0.5mL FeCl3，混勻后靜置10min，在700nm處檢測吸光值。Vc作為陽性對照。
五、對Fe2+離子螯合能力的測定
分別取1mL不同濃度（2，4，6，8mg/mL）的溶液和3.7mL蒸餾水，加入2mmol/L的FeCl2溶液0.1mL和5mmol/L的菲洛嗪溶液0.2mL，25℃水浴10min，于562nm處測吸光值。EDTA為陽性對照。樣品對Fe2+的螯合率計算公式如下：
A0—1mL蒸餾水代替反應(yīng)體系中樣品溶液后的吸光值；
A1—樣品溶液反應(yīng)后的吸光值；
A2—0.1mL的蒸餾水代替反應(yīng)體系中FeCl2溶液后的吸光值。