WB蛋白印跡檢測

一、WB蛋白印跡檢測簡介
蛋白質(zhì)印跡法（即免疫印跡試驗，Western Blot，WB）是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。也稱Western、Western blotting、Western印跡，常簡寫為WB，是將電泳分離后的細胞或組織總蛋白質(zhì)從聚丙烯酰胺凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物PVDF或NC膜膜上，然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術，現(xiàn)已廣泛應用于基因在蛋白水平的表達研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個方面。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。經(jīng)過PAGE（聚丙烯酰胺凝膠電泳）分離的蛋白質(zhì)樣品，轉(zhuǎn)移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質(zhì)，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。

二、操作步驟

三、樣本說明

四、運輸說明