??????快速DNA連接試劑盒(Rapid DNA Ligation Kit) 是碧云天研發(fā)的一種把DNA片段在短至5-10分鐘內(nèi)快速插入到載體(vector)中的連接試劑盒。對于雙粘端DNA片段的插入僅需5-10分鐘即可完成，對于雙平端DNA片段的插入僅需15分鐘即可完成。同時(shí)本試劑盒也可以用于其它各種常規(guī)的雙鏈DNA連接反應(yīng)。連接30分鐘即可達(dá)到效果，與連接過夜的效果一致。
??????本試劑盒可以用于PCR片段和載體的連接、酶切產(chǎn)物和載體的連接、linker和載體的連接、linker和linker的連接等各種雙鏈DNA的連接。
??????為了獲得快速高效的連接效果，本試劑盒采用了一種特殊的高活力Rapid T4 DNA Ligase以及相應(yīng)的快速連接緩沖液，確保在短時(shí)間內(nèi)可以獲得很好的連接效果。連接30分鐘和連接過夜的效果相當(dāng)，通常只須連接5-10分鐘即可滿足常規(guī)用途(圖1)。

??????圖1.快速DNA連接試劑盒實(shí)測效果圖。雙酶切后的載體室溫自連30min(A)或16℃自連過夜(D)作為陰性對照；雙酶切后的載體與待插入片段室溫連接10min(B)、30min(C)或者16℃連接過夜(E)，隨后轉(zhuǎn)化細(xì)菌涂板，并于第二天取平板觀察拍照。
??????在確保連接效果的同時(shí)，確保完成連接后不必進(jìn)行任何純化即可直接轉(zhuǎn)化細(xì)菌。另外，快速連接緩沖液中已經(jīng)含有ATP、鎂離子等各種必需物質(zhì)，無需再添加其它任何試劑。
??????本試劑盒用于總體積為10μl的連接體系時(shí)可以進(jìn)行100個(gè)連接反應(yīng)，用于總體積為20μl的連接體系時(shí)可以進(jìn)行50個(gè)連接反應(yīng)。
包裝清單：

保存條件：
??????-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
??????連接反應(yīng)完成后即可直接轉(zhuǎn)化細(xì)菌，請勿采用加熱方法失活Rapid T4 DNA ligase。加熱處理會導(dǎo)致后續(xù)的轉(zhuǎn)化效率顯著下降。
??????對于載體單酶切插入外源片段的情況，需注意對載體進(jìn)行脫磷處理，以避免質(zhì)粒自連。
??????快速連接緩沖液(2X)使用前一定要完全溶解并混勻，加入到連接體系后也須注意混勻。
??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。