本試劑盒采用獨(dú)特的裂解液/β-巰基乙醇迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA酶，強(qiáng)烈有機(jī)抽提去除蛋白和DNA，RNA包括微小分子RNA吸附于離心柱內(nèi)特殊硅基質(zhì)膜， 再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,漂洗液將細(xì)胞代謝物，蛋白等雜質(zhì)進(jìn)一步去除， 最后低鹽的洗脫液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

近年來對RNA干擾和調(diào)節(jié)性小RNA的廣泛研究迫切需要一種能有效提取15～30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的試劑盒。但是傳統(tǒng)的RNA提取方法如硅膠膜不能有效吸附回收，酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA。本試劑盒的出現(xiàn)很好的解決了這一問題。

產(chǎn)品組分：
Lysis/Binding buffer————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好。 克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。
2. 也不需要乙醇沉淀等容易喪失微小分子RNA的步驟。
3. 快速，簡捷，單個(gè)樣品操作一般可在30分鐘內(nèi)完成。
4. 多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9～2.0，基本無DNA殘留,可用于RNAi，RT-PCR，Northern-blot和各種實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：
1. 次使用前請先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇，加入后請及時(shí)打鉤標(biāo)記已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13000rpm 的傳統(tǒng)臺式離心機(jī)，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
3. 需要自備乙醇，氯仿，一次性注射器，研缽。
4. Lysis/Binding buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
5. 預(yù)防RNase 污染，應(yīng)注意以下幾方面：
1) 經(jīng)常更換新手套。因?yàn)槠つw經(jīng)常帶有細(xì)菌，可能導(dǎo)致RNase 污染。
2) 使用無RNase 的塑料制品和槍頭避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中時(shí)不會被RNase 降解。但提取后繼續(xù)處理過程中應(yīng)使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小時(shí)，塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分鐘，然后用水徹底清洗，再滅菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液應(yīng)使用無RNase 的水。（將水加入到干凈的玻璃瓶中，加入DEPC至終濃度0.1%( v/v)，37℃放置過夜，高壓滅菌。）
6. RNA 純度及濃度檢測：
完整性：RNA 可用普通瓊脂糖凝膠電泳(電泳條件：膠濃度1.2%；0.5×TBE 電泳緩沖液；150v，15 分鐘)檢測完整性。由于細(xì)胞中70%-80%的RNA 為rRNA，電泳后UV 下應(yīng)能看到非常明顯的rRNA 條帶。動物rRNA 大小分別約為5kb和2kb，分別相當(dāng)于28S 和18S rRNA。動物RNA 樣品中rRNA 亮度應(yīng)為次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否則表示RNA 樣品的降解。出現(xiàn)彌散片狀或條帶消失表明樣品嚴(yán)重降解。
純度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白質(zhì)污染程度的指標(biāo)。高質(zhì)量的RNA，OD260/OD280 讀數(shù)（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之間。OD260/OD280 讀數(shù)受測定所用溶液的pH 值影響。同一個(gè)RNA 樣品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中測出的OD260/OD280 讀數(shù)1.8-2.1 之間，在水溶液中所測讀數(shù)則可能在1.5-1.9之間，但這并不表示RNA 不純。
濃度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀釋n 倍，用RNase-free 水將分光光度計(jì)調(diào)零，取稀釋液進(jìn)行OD260, OD280 測定，按照以下公式進(jìn)行RNA濃度的計(jì)算：終濃度（ng/μl）= (OD260)×(稀釋倍數(shù)n)×40。

儲存條件：室溫，有效期6個(gè)月。(Lysis/Binding buffer需4℃避光保存)

本制品別名：細(xì)胞miRNA純化試劑盒|細(xì)胞miRNA分離試劑盒|細(xì)胞microRNA提取試劑盒|細(xì)胞microRNA分離試劑盒|細(xì)胞microRNA純化試劑盒|細(xì)胞microRNA提取試劑盒|組織miRNA純化試劑盒|組織miRNA分離試劑盒|組織microRNA提取試劑盒|組織microRNA分離試劑盒|組織microRNA純化試劑盒|組織microRNA提取試劑盒