丹參酮 I 在人結(jié)直腸癌細(xì)胞中以 ERK1/2 依賴性方式誘導(dǎo)細(xì)胞周期蛋白 D1 蛋白酶體降解。

據(jù)報(bào)道，丹參酮 I （TAN I） 作為丹參 （Danshen） 中天然存在的二萜之一，具有抗癌活性。然而，其潛在機(jī)制仍然知之甚少。因此，我們進(jìn)行了體外研究，以闡明 TAN I 可能誘導(dǎo)抑制人結(jié)直腸癌細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)的生物學(xué)機(jī)制。
方法和結(jié)果：
TAN I 處理抑制 HCT116 和 SW480 細(xì)胞增殖，降低細(xì)胞周期蛋白 D1 蛋白水平。然而，細(xì)胞周期蛋白 D1 的 mRNA 水平在 TAN I 處理后沒(méi)有改變。MG132 對(duì)蛋白酶體降解的抑制阻斷了 TAN I 介導(dǎo)的細(xì)胞周期蛋白 D1 下調(diào)，并且在用 TAN I 處理的細(xì)胞中細(xì)胞周期蛋白 D1 的半衰期縮短。此外，TAN I 增加了細(xì)胞周期蛋白 D1 在蘇氨酸-286 位點(diǎn)的磷酸化，蘇氨酸-286 的點(diǎn)突變減弱了 TAN I 介導(dǎo)的細(xì)胞周期蛋白 D1 下調(diào)。抑制 ERK1/2 抑制細(xì)胞周期蛋白 D1 磷酸化，隨后被 TAN I 下調(diào)。從這些結(jié)果中，我們認(rèn)為 TAN I 介導(dǎo)的細(xì)胞周期蛋白 D1 下調(diào)可能是由于蛋白酶體通過(guò)其 ERK1/2 介導(dǎo)的蘇氨酸-286 磷酸化而降解引起的。
結(jié)論：
總之，目前的研究提供了 TAN I 、細(xì)胞周期蛋白 D1 下調(diào)與人結(jié)直腸癌細(xì)胞細(xì)胞生長(zhǎng)之間的新機(jī)制聯(lián)系。

丹參酮 I 選擇性抑制活化的小膠質(zhì)細(xì)胞中的促炎基因表達(dá)，并防止帕金森病小鼠模型中的黑質(zhì)紋狀體多巴胺能神經(jīng)變性。

丹參，又稱丹參，是一種著名的中草藥，數(shù)千年來(lái)被廣泛用于治療各種疾病，包括心腦血管疾病和神經(jīng)退行性疾病。丹參酮 I 是丹參的主要生物活性黃酮類化合物之一。調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)度反應(yīng)可能代表緩解神經(jīng)退行性疾病進(jìn)展的治療靶點(diǎn)。在這里，我們測(cè)試了丹參酮 I 對(duì)神經(jīng)炎癥的影響，以及它是否可以通過(guò)抑制神經(jīng)炎癥來(lái)提供神經(jīng)保護(hù)。
方法和結(jié)果：
通過(guò) Griess 反應(yīng)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 （Elisa） 或?qū)崟r(shí)聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)丹參酮 I 對(duì)脂多糖 （LPS） 誘導(dǎo)的 BV-2 小膠質(zhì)細(xì)胞促炎和抗炎因子產(chǎn)生和/或 mRNA 表達(dá)的影響。通過(guò)核轉(zhuǎn)位 p65 和 DNA 結(jié)合活性測(cè)量核因子 κ B （NF-κB） 的激活。通過(guò)在 C57BL/6 小鼠中處理 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶 （MPTP） 建立了帕金森病模型。通過(guò)旋轉(zhuǎn)試驗(yàn)、高效液相色譜 （HPLC）-ECD、免疫組化和 Elisa 研究丹參酮 I 對(duì)行為改變、多巴胺及其代謝產(chǎn)物水平、酪氨酸羥化酶 （TH） 和 IBA-1 表達(dá)、中腦細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響。HPLC 檢測(cè) 1-甲基-4-苯基吡啶 （MPP+） 濃度。通過(guò)生化測(cè)定和組織化學(xué)測(cè)定肝臟毒性。 我們發(fā)現(xiàn)丹參酮 I 在 LPS 誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞中高度抑制了一氧化氮 （NO） 、腫瘤壞死因子-α （TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β （IL-1β） 和 IL-6 等幾種促炎 M1 因子的產(chǎn)生和/或表達(dá)。有趣的是，它并不影響一些抗炎 M2 小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)增強(qiáng)，包括 IL-10 、 IL-1 受體拮抗劑 （IL-1Ra） 和 Cox-2。但它可以顯著抑制 LPS 誘導(dǎo)的粒細(xì)胞集落刺激因子 （G-CSF） 表達(dá)。丹參酮 I 還可以抑制 LPS 誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞中 NF-κB 活化。此外，它改善了運(yùn)動(dòng)功能，使紋狀體神經(jīng)遞質(zhì)正?；?，并為 MPTP 中毒的小鼠提供了多巴胺能神經(jīng)元保護(hù)。體內(nèi)結(jié)果還表明，丹參酮 I 可以調(diào)節(jié) MPTP 誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞活化，減輕 TNF-α 的增加，保留 MPTP 中毒小鼠 IL-10 同感劑的增加。丹參酮 I 不會(huì)改變 MPTP 毒性代謝物 （MPP+） 濃度。每天 10 毫克/千克口服丹參酮 I 2 周未顯示肝毒性。
結(jié)論：
丹參酮 I 選擇性抑制活化小膠質(zhì)細(xì)胞中促炎 M1 基因的表達(dá)，有趣的是，部分保留的抗炎 M2 基因表達(dá)。它還可以在帕金森病的小鼠模型中提供神經(jīng)保護(hù)。這些數(shù)據(jù)表明，丹參酮 I 可以充分利用活化的小膠質(zhì)細(xì)胞的有益一面，同時(shí)最大限度地減少有害一面，并通過(guò)調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞的免疫反應(yīng)來(lái)提供神經(jīng)保護(hù)。

丹參酮 I 通過(guò)誘導(dǎo) CYP1A 保護(hù)小鼠免受馬兜鈴酸 I 誘導(dǎo)的腎損傷。

肝 CYP1A 尤其是 CYP1A2 在降低馬兜鈴酸 I （AAI） 腎毒性中起重要作用。
方法和結(jié)果：
在本研究中，我們研究了 Cyp1a 的強(qiáng)誘導(dǎo)劑丹參酮 I 對(duì) AAI 誘導(dǎo)的腎毒性的影響。組織病理學(xué)和血液生化測(cè)定顯示，丹參酮 I 可以減少 AAI 誘導(dǎo)的急性腎損傷。藥代動(dòng)力學(xué)分析顯示，丹參酮 I 顯著降低血漿中 AAI 的 AUC 以及肝臟和腎臟中 AAI 的含量，表明 AAI 代謝增強(qiáng)。實(shí)時(shí) PCR 和 Western blot 分析證實(shí)，丹參酮 I 在體內(nèi)有效提高了肝臟 CYP1A1 和 CYP1A2 的 mRNA 和蛋白水平。熒光素酶測(cè)定顯示，丹參酮 I 在相似程度上強(qiáng)烈增加 CYP1A1 和 CYP1A2 的轉(zhuǎn)錄活性。
結(jié)論：
綜上所述，我們的數(shù)據(jù)表明，丹參酮 I 通過(guò)在體內(nèi)誘導(dǎo)肝 CYP1A 1/2 促進(jìn) AAI 的代謝并預(yù)防 AAI 誘導(dǎo)的腎損傷。

丹參酮 I 通過(guò)增加 Wnt-3、磷酸化糖原合成酶激酶-3β 和 β-連環(huán)蛋白免疫反應(yīng)性來(lái)增強(qiáng)小鼠海馬齒狀回腸的神經(jīng)發(fā)生。

丹參酮 I （TsI） 是一種從丹山 （Radix Salvia miltiorrhizae） 中提取的親脂性二萜，在包括短暫性腦缺血發(fā)作在內(nèi)的腦血管疾病中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。 在這項(xiàng)研究中，我們使用 Ki-67、BrdU 和雙皮質(zhì)素 （DCX） 免疫組織化學(xué)檢查了 TsI 對(duì)小鼠齒狀回 （DG） 亞顆粒區(qū) （SGZ） 細(xì)胞增殖和神經(jīng)元分化的影響。
方法和結(jié)果：
小鼠用 1 和 2 mg/kg TsI 處理 28 天。在 1 mg/kg TsI 處理組中，SGZ 中 BrdU 、 Ki-67 和 DCX 陽(yáng)性 （（+）） 細(xì)胞的分布模式與載體處理組中的分布模式相似。然而，在 2 mg/kg TsI 處理組中，雙標(biāo)記的 BrdU （+）/NeuN （+） 細(xì)胞，即成熟神經(jīng)元，以及 Ki-67 （+），DCX （+） 和 BrdU （+） 細(xì)胞與載體處理組相比顯著增加。另一方面，與形態(tài)發(fā)生相關(guān)的 Wnt-3、β-catenin 和絲氨酸-9-糖原合酶激酶-3β （p-GSK-3β） 的免疫反應(yīng)性和蛋白水平僅在 2 mg/kg TsI 處理組在 DG 顆粒細(xì)胞層中顯著增加。
結(jié)論：
因此，這些發(fā)現(xiàn)表明 TsI 可以促進(jìn)小鼠 DG 的神經(jīng)發(fā)生，并且神經(jīng)發(fā)生與 Wnt-3 、 p-GSK-3β 和 β-catenin 免疫反應(yīng)性的增加有關(guān)。