方法和結(jié)果:研究白頭翁湯 (PD) 的抗炎機(jī)制,測(cè)定培養(yǎng)的大鼠腸道微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (RIMECs) 分泌的白細(xì)胞介素 (IL)-6 、 IL-8 、 E-選擇素和血栓素 B(2) (TXB(2)) 的水平 用其活性成分銀蓮花苷 B4 處理后、海葵素、小檗堿、Jatrorrhizine、Palmatine、七葉苷和七葉苷。用 1 μg/mL 脂多糖 (LPS) 攻擊 RIMECs 3 h,然后用三種濃度 (1、5 和 10 μg/mL) 的 7 種成分分別處理 24 h。結(jié)果顯示,海葵素、七葉苷和七葉苷抑制 IL-6 的產(chǎn)生,七葉苷和七葉苷抑制 IL-8 的分泌,???B4、小檗堿和姜黃堿下調(diào) E-選擇素表達(dá),???、小檗堿、姜黃素和棕櫚堿降低 TXB 的含量 (2)。所有這些變化都很重要。結(jié)論:綜上所述,PD 的 7 種有效成分均可有效降低炎癥反應(yīng),從而通過(guò)多種途徑緩解腸道功能障礙。
白頭翁 (Bunge) Regel 的 rizoma 已被用作傳統(tǒng)中藥材數(shù)千年。中華白楊總皂苷可誘導(dǎo)實(shí)體癌細(xì)胞凋亡;然而,它們對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病的活性和機(jī)制仍然未知。 研究總皂苷和中華白楊皂苷中主要活性組分對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病的活性,并闡明抗癌活性的潛在機(jī)制。方法和結(jié)果:MTT 檢測(cè)細(xì)胞毒活性;流式細(xì)胞術(shù)系統(tǒng)檢測(cè)細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞凋亡;使用 JC-1 測(cè)定線(xiàn)粒體膜電位的變化;通過(guò) western blotting 確定細(xì)胞凋亡信號(hào)通路。 我們證明 P. chinensis 總皂苷對(duì) K562 細(xì)胞系具有細(xì)胞毒活性。此外,我們從總皂苷中鑒定出 23-羥基白樺酸 (HBA) 、 肺紅苷 A (PA) 和海葵苷 B4 (AB4),其中細(xì)胞毒性化合物 HBA 最強(qiáng)。HBA 的 C3 和 C28 位點(diǎn)的糖基化顯著降低其細(xì)胞毒性。HBA 可促進(jìn)細(xì)胞周期停滯在 S 期,并通過(guò)內(nèi)源性途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。HBA 顯著破壞線(xiàn)粒體膜電位 (p < 0.01) 并選擇性下調(diào) Bcl-2、存活素的水平并上調(diào) Bax、細(xì)胞色素 C、裂解的 caspase-9 和 -3。結(jié)論:中華白楊總皂苷可能是對(duì)抗人類(lèi)慢性粒細(xì)胞白血病的有效天然產(chǎn)物;HBA 是負(fù)責(zé)其抗癌活性的生物活性成分之一,可以作為白血病的替代治療藥物進(jìn)一步研究。
雖然 T 淋巴細(xì)胞是負(fù)責(zé)宿主對(duì)病毒反應(yīng)(包括誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)以幫助最終清除病毒)的主要細(xì)胞類(lèi)型,但其他細(xì)胞,包括巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞和樹(shù)突狀細(xì)胞也起著關(guān)鍵作用。內(nèi)皮細(xì)胞在病毒感染期間的生理/病理過(guò)程(如炎癥)中也起著重要作用。由于內(nèi)皮細(xì)胞可以被激活以釋放各種內(nèi)源性化合物,包括一些細(xì)胞因子,因此細(xì)胞細(xì)胞因子形成的離體測(cè)量可用于間接評(píng)估任何潛在的原位內(nèi)皮功能障礙。 這里介紹的研究旨在研究五種皂苷對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的潛在免疫調(diào)節(jié)作用:柴胡皂苷 A (SSA) 和 D (SSD)、三七皂苷 (PNS) 和三七皂苷 R1 (SR1) 和海葵苷 B4 (AB4)。方法和結(jié)果:為此,用病毒分離物 PCV2-AH 攻擊細(xì)胞 (豬髂動(dòng)脈內(nèi)皮系) 24 小時(shí),然后用測(cè)試皂苷 (1、5 或 10 μg/ml) 在 37 °C 下再處理 24 小時(shí)。 然后收集培養(yǎng)上清液,并通過(guò) ELISA 分析白細(xì)胞介素 (IL) -2 、 -4 和 -10 以及干擾素 (IFN) -γ。結(jié)果顯示 PNS 和 SR1 抑制 IL-4 的產(chǎn)生;PNS 、 SR1 和 AB4 抑制 IL-10 的分泌;SSA、SSD 和 PNS 上調(diào) IL-2 表達(dá);SSA 和 SSD 提高了 IFNγ 水平。所有這些變化都很重要。結(jié)論:綜上所述,數(shù)據(jù)表明這些皂苷可能具有通過(guò)改變受感染的內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生這些選定細(xì)胞因子來(lái)調(diào)節(jié)體內(nèi)免疫反應(yīng)的能力。然而,這些藥物對(duì)參與抗病毒反應(yīng)的其他關(guān)鍵細(xì)胞類(lèi)型(包括 T 淋巴細(xì)胞)的影響仍有待確定。
奧沙利鉑 (L-OHP) 是結(jié)直腸癌最常用的化療藥物之一,L-OHP 耐藥在結(jié)直腸癌治療中非常常見(jiàn)。本研究旨在探討銀風(fēng)苷 B4 (AB4) 和四丁堿 (Tet) 對(duì) L-OHP 耐藥人結(jié)腸癌細(xì)胞系 LoVo/L-OHP 的逆轉(zhuǎn)作用,并闡明它們的分子機(jī)制。方法和結(jié)果:用不同濃度的 AB4 和 Tet 處理 LoVo/L-OHP 細(xì)胞 48 h,獲得無(wú)毒劑量。通過(guò) MTT 測(cè)量藥物敏感性。處理后,檢測(cè)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡情況。RT-PCR 檢測(cè) P-gp mRNA 、 zDHHC9 mRNA 和 SMAD4 mRNA 的表達(dá)。Western blot 檢測(cè) P-gp 、 zDHHC9 和 SMAD4 蛋白的表達(dá)。LoVo/L-OHP 對(duì) L-OHP 的 IC50 為 (112.5±23.6) μg/mL,0.71 μg/mL AB4 和 0.45 μg/mL Tet(無(wú)毒劑量)處理后,IC50 降至 (62.8±21.4) μg/mL(P<0.05)和 (58.9±26.3) μg/mL(P<0.05)。細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)顯示,G1 期細(xì)胞減少,S 期細(xì)胞增加,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)。細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)顯示,AB4 和 Tet 無(wú)毒劑量處理后凋亡率增加,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)。RT-PCR 實(shí)驗(yàn)顯示,與 LoVo 細(xì)胞相比,LoVo/L-OHP 細(xì)胞中 P-gp mRNA 和 zDHHC9 mRNA 的表達(dá)增加,SMAD4 mRNA 降低 (P<0.05),而發(fā)現(xiàn)無(wú)毒劑量 AB4 處理后 LoVo/L-OHP 細(xì)胞中的 P-gp mRNA 降低 (P<0.05)。Western blot 實(shí)驗(yàn)顯示,AB4 處理后 LoVo/L-OHP 細(xì)胞中 P-gp 蛋白降低 (P<0.05),這與 PCR 結(jié)果一致。Tet 處理后,LoVo/L-OHP 細(xì)胞中 zDHHC9 蛋白在 LoVo/L-OHP 細(xì)胞中的表達(dá)降低 (P<0.05)。結(jié)論:AB4 和 Tet 對(duì) LoVo/L-OHP 細(xì)胞對(duì) L-OHP 的耐藥有一定的逆轉(zhuǎn)作用。抵抗反向效應(yīng)的分子機(jī)制與 AB4 P-gp 的下調(diào)和 Tet 的 zDHHC9 下調(diào)有關(guān)。
方法和結(jié)果:開(kāi)發(fā)了一種使用高效液相色譜-電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜 (HPLC-ESI-MS/MS) 的新型定性和定量方法,用于同時(shí)測(cè)定白頭翁 (Thunb) 中的 9 種主要活性成分。伯希特。等,即銀線(xiàn)苷 A3 (1)、???B4 (2)、23-羥基白樺酸 (3)、肉蓉甙 S (4)、方頭甙 B (5)、方頭甙 C (6)、齊墩果酸 (7)、胯甾酮 C (8) 和β-蛻皮甾酮 (9)。分析過(guò)程中使用 Sapphire C18 色譜柱(250 mm × 4.6 mm、5 μm)和梯度洗脫。分析物的鑒定和定量是在混合型四極桿線(xiàn)性離子阱質(zhì)譜儀上實(shí)現(xiàn)的。采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè) (MRM) 掃描進(jìn)行定量,在單次運(yùn)行中在正離子模式和負(fù)離子模式之間切換電噴霧離子源極性。所有校準(zhǔn)曲線(xiàn)在測(cè)試范圍內(nèi)均顯示出良好的線(xiàn)性度 (r(2) > 0.9948)。9 種分析物的日內(nèi)和日間變化分別小于 3.95% 和 3.78%。該方法成功應(yīng)用于測(cè)定 15 批天然和培養(yǎng)的 P. cernua 樣品中研究的化合物。結(jié)論:結(jié)果表明,該方法簡(jiǎn)單、快速、特異、可靠,有助于綜合評(píng)價(jià) P. cernua 品質(zhì)。
CAS號(hào)為129741-57-7的化學(xué)物質(zhì)是白頭翁皂苷B4,以下是對(duì)該化學(xué)物質(zhì)的詳細(xì)介紹:
CAS號(hào):129741-57-7
英文名:Anemoside B4;PULCHINENOSIDE B4;Pulsatilla saponin B4
別名:白頭翁皂甙B4;Chinensioside A;Pulchinenoside C
分子式:C59H96O26
分子量:1221.38
外觀(guān):白色結(jié)晶粉末
熔點(diǎn):208~215°C
白頭翁皂苷B4可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑。此外,它還具有特定的物理化學(xué)性質(zhì),如酸度系數(shù)(pka)為12.50±0.70(Predicted)。
白頭翁皂苷B4主要來(lái)源于毛茛科植物白頭翁(Pulsatilla chinensis (Bge.) Regel)的干燥根。它是從這種植物中提取出的一種天然化合物,具有多種生物活性。
含量測(cè)定:白頭翁皂苷B4常用作含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌罚谒幬锓治?、質(zhì)量控制等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
藥理實(shí)驗(yàn):它也被用于藥理實(shí)驗(yàn),以研究其生物活性和藥理作用。研究表明,白頭翁皂苷B4在體外能夠通過(guò)細(xì)胞周期G2/M阻滯抑制HepG2細(xì)胞增殖,并且可能因調(diào)高其Caspase 3表達(dá)而誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡,這為白頭翁藥材的應(yīng)用奠定了理論基礎(chǔ)。
科學(xué)研究:白頭翁皂苷B4還可用于生化與分子生物學(xué)領(lǐng)域的研究,如信號(hào)通路研究、細(xì)胞增殖與凋亡研究等。
白頭翁皂苷B4應(yīng)在2~8°C的低溫下避光保存,以確保其穩(wěn)定性和活性。長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中可能會(huì)導(dǎo)致其含量降低。
綜上所述,白頭翁皂苷B4是一種具有多種生物活性的天然化合物,主要來(lái)源于白頭翁的干燥根。它在藥物分析、藥理實(shí)驗(yàn)以及科學(xué)研究等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。在使用時(shí)需要注意其保存條件,并選擇合適的供應(yīng)商和產(chǎn)品以滿(mǎn)足具體需求。
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王玲