細(xì)胞凋亡的一個(gè)顯著特點(diǎn)是細(xì)胞染色體DNA的降解, 這是一個(gè)較普遍的現(xiàn)象。這種降解非常特異并有規(guī)律,所產(chǎn)生的不同長(zhǎng)度的DNA片段約為180 bp-200 bp的整數(shù)倍,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)特異的梯狀Ladder圖譜,本試劑盒采用TUNEL法,應(yīng)用末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細(xì)胞斷裂DNA的3′-OH末端催化摻入YF488-dUTP。YF488-dUTP標(biāo)記的DNA可以用熒光顯微鏡直接觀察或者用流式細(xì)胞儀定量。TUNEL法可以選擇性的檢測(cè)凋亡細(xì)胞,而非壞死 細(xì)胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細(xì)TUNEL 實(shí)驗(yàn)中, TdT 酶催化 dUTP 摻入斷裂的 DNA 鏈的3′-OH末端。抗原標(biāo)記的 dUTP(如 digoxin-dUTP、生物 素-dUTP),因?yàn)樗梢灾苯舆M(jìn)行原位檢測(cè),是一種更快速、 直接的檢測(cè)手段。
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