一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)

中文名稱：一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)

英文名稱：One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：20次|50次

本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細(xì)胞凋亡檢測方法。對于經(jīng)過固定和洗滌的細(xì)胞或組織，只要經(jīng)過一步染色反應(yīng)，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測到呈現(xiàn)綠色熒光的凋亡細(xì)胞。本試劑盒足夠檢測20個(gè)樣品。

試劑盒組份：
TdT酶——————————40μl
熒光標(biāo)記液————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)————500μl

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時(shí)，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標(biāo)記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細(xì)胞凋亡的原理。注：FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫，實(shí)際上大多數(shù)情況下所謂的FITC即為fluorescein。

本試劑盒有如下優(yōu)點(diǎn)。
(1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色明亮，可以在單細(xì)胞水平檢測到細(xì)胞凋亡，同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細(xì)胞凋亡。
(2)特異性：TUNEL檢測時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。
(3)快速：僅需約1-2個(gè)小時(shí)即可完成。
(4)方便：只需一步染色反應(yīng)，洗滌后即可觀察，不必使用二抗等進(jìn)行多步操作。
(5)應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。

TUNEL法特異性檢測細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。

極少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒有DNA斷裂，此時(shí)不適用TUNEL法檢測。在個(gè)別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，同時(shí)檢測多個(gè)凋亡指標(biāo)。

注意事項(xiàng)：
1. 需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS或HBSS，用于封片的抗熒光淬滅封片液(，用于固定的4%多聚甲醛或向訂購免疫染色固定液，同時(shí)需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向訂購免疫染色洗滌液()。
2. 如果用于石蠟切片的檢測，需自備蛋白酶K，二甲苯。

儲存條件：-20℃。
 

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！