果糖(fructose ,FT)含量試劑盒說明書
分光光度法50管/48樣
注 意 :正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
果糖(fructose ,F(xiàn)T)含量試劑盒測定意義:
果糖是一種最為常見的己酮糖,是葡萄糖的同分異構(gòu)體,以游離狀態(tài)大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中,能與葡萄糖結(jié)合生成蔗糖。果糖是最甜的單糖,廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、保健品生產(chǎn)中。
測定原理:
果糖與間苯二酚反應(yīng),生成有色物質(zhì),在480nm下有特征吸收峰。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、蒸餾水
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100ml×1瓶,4℃保存;
試劑一:1mg/mL標(biāo)準(zhǔn)液10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體 40ml×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體 15ml×1瓶,4℃避光保存;
試劑四:粉劑0.5g×1瓶,常溫保存。
果糖提?。?/span>
稱取0.1~0.2g樣本,常溫研碎;加入1mL提取液,適當(dāng)研磨后快速轉(zhuǎn)移到有蓋離心管中;置于80℃水浴鍋中10min(蓋緊,以防止水分散失),振蕩3~5次,冷卻后,4000g,25℃離心10min,取上清;加入少量(約2mg)試劑四,80℃脫色30min(蓋緊,以防止水分散失);再加入1mL提取液,4000g,25℃離心10min,取上清液測定。
果糖(fructose ,F(xiàn)T)含量試劑盒測定步驟:
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至480nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 樣本測定(在1.5mL EP管中依次加入下列試劑):
試劑(μL) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 |
樣本 |
|
| 100 |
試劑一 |
| 100 |
|
蒸餾水 | 100 |
|
|
試劑二 | 700 | 700 | 700 |
試劑三 | 200 | 200 | 200 |
混勻,95℃水浴反應(yīng)30min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后測定480nm處光吸收值,空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測定管分別記為A1、A2和A3。
果糖含量計(jì)算:
1、果糖含量(mg/mg prot)=(C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行測定蛋白濃度。
2、果糖含量(mg/g鮮重)=(C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。
C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,1mg/mL;V1:加入樣本體積,0.1mL;V2:加入提取液體積,2mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
注意:最低檢測限為100ng/g鮮重或1ng/mg
關(guān)鍵字: 果糖(fructose?,F(xiàn)T)含量試劑;果糖(fructose?,F(xiàn)T)含量試劑;
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度,深得新老客戶厚愛,本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽(yù)”的精神,堅(jiān)持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽(yù)為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
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