D-二聚體是由兩個D片段通過交聯(lián)連接而成的纖維蛋白蛋白。它是血栓溶解過程中血栓降解形成的幾種纖維蛋白降解產物（FDP）之一。D-二聚體用于診斷彌散性血管內凝血等血液疾病以及血栓的診斷。本試劑盒旨在定量檢測小鼠血漿中的纖維蛋白原D-二聚體蛋白。請注意，該試劑盒也作為CLIA試劑盒abx490569提供。

艾美捷小鼠D-二聚體ELISA試劑盒：

貨號：abx258705

靶標：D-二聚體  

反應性：小鼠  

已測試應用：ELISA  

推薦稀釋度：最終用戶應確定最佳稀釋度/濃度。  

儲存：以4°C運輸。收到后，根據(jù)試劑盒說明書中的儲存說明儲存試劑盒。  

有效期：該試劑盒的有效期至少為6個月。根據(jù)要求可提供長達12個月的有效期。  

穩(wěn)定性：試劑盒的穩(wěn)定性由活性損失率決定。在適當?shù)膬Υ鏃l件下，到期日內的損失率小于5%。為盡量減少性能波動，應嚴格控制操作程序和實驗室條件。還強烈建議整個檢測過程由同一用戶完成。  

檢測范圍：61.7 ng/ml - 5000 ng/ml  

小鼠D-二聚體ELISA試劑盒檢測原理：

該試劑盒基于競爭酶聯(lián)免疫吸附測定技術。96孔板上預先包被有抗體。將標準品、測試樣品和生物素偶聯(lián)試劑加入孔中并孵育。生物素標記的D-二聚體與未標記的D-二聚體在預包被抗體上發(fā)生競爭抑制反應。然后加入HRP偶聯(lián)試劑，并將整個板孵育。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的偶聯(lián)物。使用TMB底物定量HRP酶促反應。加入TMB底物后，只有含有足夠D-二聚體的孔才會產生藍色產物，加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強度與板上結合的D-二聚體量成反比。在450 nm波長下用微孔板讀數(shù)器比色法測量光密度（OD），從而計算出D-二聚體的濃度。  

小鼠D-二聚體ELISA試劑盒組分：

- 預包被的96孔微孔板  

- 標準品  

- 標準品稀釋緩沖液  

- 洗滌緩沖液  

- 檢測試劑A  

- 檢測試劑B  

- 稀釋液A  

- 稀釋液B  

- TMB底物  

- 終止液  

- 板封  

所需但未提供的材料：  

- 37°C培養(yǎng)箱  

- 多通道和單通道移液器及無菌移液器頭  

- 噴霧瓶或自動微孔板洗滌器  

- 1.5 ml試管  

- 蒸餾水  

- 吸水濾紙  

- 100 ml和1升量筒  

- 微孔板讀數(shù)器（波長：450 nm）  

- ELISA振蕩器  

試劑準備：  

1）標準品：用推薦體積的標準品稀釋緩沖液制備標準品溶液。然后按照協(xié)議中的指示，用標準品稀釋緩沖液進行標準品溶液的系列稀釋。  

2）洗滌緩沖液：按照協(xié)議中的指示，用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液。  

3）檢測試劑準備：計算所需的工作溶液總量。分別用稀釋液A和稀釋液B將檢測試劑A和檢測試劑B按1:100稀釋。  

檢測程序：  

1）設置標準品、測試樣品和對照孔。  

2）將50 µl稀釋后的標準品加入標準品孔中。  

3）將50 µl標準品稀釋緩沖液加入對照（零）孔中。  

4）將50 µl稀釋后的樣品加入樣品孔中。  

5）立即向每個孔中加入50 µl檢測試劑A。在37°C下孵育1小時。  

6）洗滌3次。  

7）向每個孔中加入100 µl檢測試劑B。在37°C下孵育30分鐘。  

8）洗滌5次。  

9）向每個孔中加入90 µl TMB底物。在37°C下孵育10-20分鐘。  

10）加入50 µl終止液。  

11）在450 nm處測量OD值。  

結果計算：

該檢測為競爭性檢測，因此樣品中D-二聚體濃度與測量的吸光度之間存在反相關關系。創(chuàng)建一個以標準濃度的對數(shù)為縱軸、平均吸光度為橫軸的圖表。通過標準點應用最佳擬合趨勢線。樣品的D-二聚體濃度可以從標準曲線上插值計算得出。  

檢測精密度：  

- 批內精密度（同一檢測內的精密度）：分別在一塊板上測試3個低、中、高濃度水平的D-二聚體樣品，各測試20次。  

- 批間精密度（不同檢測之間的精密度）：在3塊不同的板上測試3個低、中、高濃度水平的D-二聚體樣品，每塊板8個重復。  

- CV（%）=（標準差/平均值）× 100  

- 批內精密度：CV<10%  

- 批間精密度：CV<12%  

標準品：50 ng/ml

顯示鼠標D-二聚體標準OD數(shù)據(jù)的圖表

https://www.amyjet.com/products/abx258705.shtml