PDHE1-B(丙酮酸脫氫酶E1組分亞基β-1)是丙酮酸脫氫酶復合物(PDC)的E1β亞基,催化丙酮酸向乙酰輔酶A和CO2的整體轉化。
艾美捷抗PDHE 1-B|丙酮酸脫氫酶E1組分亞基β-1,線粒體:
貨號:AS23-4975
免疫原:來自擬南芥(Arabidopsis thaliana)PDHE1-B蛋白序列的KLH偶聯(lián)獨特肽,UniProt: Q38799 TAIR: AT5G50850
宿主:兔
克隆性:多克隆
純度:抗原親和純化血清,溶于pH 7.4的PBS中
形式:凍干
數(shù)量:50 ug
復溶:復溶時,加入50 ?l無菌或去離子水。
儲存:凍干/復溶后存放于-20°C;復溶后請分裝以避免反復凍融。打開前請簡短離心以避免凍干物粘附于管蓋或管壁導致?lián)p失。
測試應用:Western blot (WB)
推薦稀釋度:1 : 500 - 1: 2000 (WB)
預期 | 表觀分子量:39.2 | 37 kDa(信號肽被移除)
確認反應性:擬南芥
預測反應性:花生(Arachis hypogaea)、短柄草(Brachypodium distachyon)、甘藍型油菜(Brassica napus)、大麻(Cannabis sativa)、辣椒(Capsicum annuum)、柑橘(Citrus sp.)、黃瓜(Cucumis sativus)、大豆(Glycine max)、棉花(Gossypium sp.)、大麥(Hordeum vulgare)、蘋果(Malus domestica)、木薯(Manihot esculenta)、苜蓿(Medicago truncatula)、煙草(Nicotiana tabacum)、水稻(Oryza sativa)、豌豆(Pisum sativum)、楊樹(Populus sp.)、番茄(Solanum lycopersicum)、馬鈴薯(Solanum tuberosum)、高粱(Sorghum bicolor)、菠菜(Spinacia oleracea)、可可(Theobroma cacao)、小麥(Triticum sp.)、葡萄(Vitis vinifera)、玉米(Zea mays)
無反應性:目前尚無已知的與預測反應性不符的例外情況
樣品:
1 - 40 ug擬南芥Col-0全葉提取物。
2 - 40 ug擬南芥突變體iar4(AT1G24180),擬南芥丙酮酸脫氫酶E1a樣亞基。
3 - 40 ug擬南芥突變體iar4l-1(AT1G59900),擬南芥丙酮酸脫氫酶E1a亞基。
4 - 40 ug擬南芥突變體iar4l-2(AT1G59900),擬南芥丙酮酸脫氫酶E1a亞基。
5 - 40 ug擬南芥突變體SALK_004367C(AT5G50850),擬南芥丙酮酸脫氫酶E1組分亞基β-1。T-DNA插入位于AT5G50850的3'UTR區(qū)域,因此SALK_004367C可能不是mtPDH-E1b的敲除突變體。
從擬南芥全蓮座葉中新鮮提取的總蛋白40 ug/孔。精確的緩沖液成分包括:50 mM Tris-HCl(pH 7.5)、150 mM NaCl、0.5 mM EDTA、10%(v/v)甘油、1%(v/v)Nonidet P-40(NP-40)、1%(w/v)脫氧膽酸鈉、0.1%(w/v)SDS、1 × Complete蛋白酶抑制劑混合物(Roche)、1 mM PMSF,并用5xSDS樣品緩沖液(300 mM Tris-HCL(pH 6.8)、10% SDS、0.1%溴酚藍、50%甘油、500 mM DTT)在95°C/5分鐘下變性。樣品在室溫下在10% SDS-PAGE上分離,并用iBlotu Dry Blotting System(Invitrogen)在室溫下轉移到硝酸纖維素膜(孔徑0.2 um)7分鐘。膜用5%牛奶在室溫下振蕩封閉3小時。然后將膜在2%牛奶中1: 500稀釋的一抗中振蕩過夜/4°C。棄去一抗溶液,膜簡短沖洗兩次,然后在室溫下振蕩用PBS-T洗滌5次,每次5分鐘。膜在2%牛奶中1: 5000稀釋的匹配二抗(抗兔IgG辣根過氧化物酶偶聯(lián))中振蕩孵育1小時/室溫。膜按前述方法洗滌,并用AS16 ECL-N-10 Agrisera Bright化學發(fā)光檢測試劑顯影。曝光時間為1分鐘。
為了提高信噪比,一抗可以使用1: 1000或1: 2000稀釋度,在室溫下孵育1小時。
感謝瑞士日內瓦大學植物學與植物生物學系的Mengping Li博士提供。
https://www.amyjet.com/products/AS23-4975.shtml