1.簡介
CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus是一組弱陽離子交換層析填料。結(jié)合容量和結(jié)合動力學(xué)高于IEX SepFast HighRes。由于CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus具有高分辨率和高載量,特別適用于需要以高通量和高成本效益的方式純化困難分子的過程。
CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus采用平衡設(shè)計,可提供高分辨率和高載量,以分離生物工藝應(yīng)用中的類似成分。核心優(yōu)勢是:
·高流速下的高樣品載量
·高載量下的高分辨率
基礎(chǔ)基質(zhì)基質(zhì)由高度交聯(lián)的瓊脂糖和葡聚糖制成,具有優(yōu)異的流動性。它對生物加工行業(yè)中遇到的大多數(shù)化學(xué)條件都非常穩(wěn)定。
2. 產(chǎn)品特性
表1 CM SepFast HighRes Plus的特性
*測試條件:10 mM緩沖液 pH 7.5,上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì),停留時間5分鐘,50%穿透。
3.方法優(yōu)化
建議在載量、流速、結(jié)合pH值、結(jié)合離子強(qiáng)度、洗脫速度和梯度等參數(shù)之間進(jìn)行篩選。由于CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus的快速孔隙可及性,結(jié)合步驟可以在比洗脫步驟更快的流速下完成。建議特別注意優(yōu)化洗脫條件以獲得分離能力。
強(qiáng)離子交換層析填料可以在較寬的pH范圍內(nèi)保持其電荷(并因此保持其功能),而弱離子交換層析填料的離解程度和離子交換容量隨pH值而變化。因此,如果使用弱離子交換層析填料,優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵。
通常在優(yōu)化方法時,平衡組分分離度與工藝產(chǎn)量是主要考慮因素。此外,對于不穩(wěn)定或?qū)羟辛γ舾蟹肿拥募兓?,需要?yōu)化操作條件以平衡產(chǎn)量和對目標(biāo)分子可能造成的損害。
4.裝柱
CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus由高度交聯(lián)的珠狀瓊脂糖制成,具有出色的機(jī)械強(qiáng)度。CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何類型的色譜柱中。典型的包裝壓力高達(dá)3 bar。
5.保養(yǎng)
根據(jù)不同的應(yīng)用,層析填料可能會被多次使用。如需重復(fù)使用,請參閱以下說明。
(1)再生
每次運(yùn)行后,用高離子強(qiáng)度溶液(例如1M NaCl緩沖液)或增加pH 值。
(2)就地清洗 (CIP)
CIP是一種去除強(qiáng)結(jié)合物質(zhì)的程序,例如再生后殘留在吸附劑表面的脂質(zhì)、內(nèi)毒素和變性蛋白質(zhì)。定期 CIP 可防止污染物在填充床中積聚,并有助于保持色譜柱性能。
應(yīng)根據(jù)存在的污染物類型為每個過程制定具體的 CIP程序。CIP 的頻率取決于各個應(yīng)用的性質(zhì)。
以下信息可作為一般指導(dǎo):濃度高達(dá)2 M的鹽可用于清除因離子相互作用而結(jié)合的雜質(zhì)。疏水性結(jié)合的污染物可以通過以下試劑去除:1 M NaOH、低比例的非離子洗滌劑(例如0.1-2%)、堿性或酸性條件下的30% 異丙醇(例如在乙酸或磷酸存在下)。也可以探索上述試劑的組合。一般來說,孵育時間應(yīng)該更長(例如從 30 min到2 h),以確保污染物完全解離。
(3)消毒
建議使用0.5?1.0 M NaOH接觸1 h進(jìn)行消毒。
6.儲存
CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus應(yīng)儲存在20%乙醇中(強(qiáng)陽離子交換層析填料含有0.2 M NaAC)以防止微生物生長。CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus存儲在4℃到30℃的溫度下。使用前,用至少5倍體積的運(yùn)行緩沖液來平衡層析填料。
7.更多信息
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8.訂購信息