糖基化修飾
糖基化修飾是真核細胞內(nèi)常見的翻譯后修飾，指一個或多個糖基通過共價鍵連接到蛋白質(zhì)分子上。這種修飾對蛋白質(zhì)的折疊、穩(wěn)定性、活性以及細胞間信號傳遞有重要影響。
蛋白質(zhì)的糖基化修飾主要分位兩類：N-連接糖基化和O-連接糖基化。N-連接糖基化的糖鏈連接在NXT/S(其中X是除脯氨酸外的任意氨基酸)的N(天冬酰胺)上，連接在N上的寡糖鏈又分為高甘露糖型，雜合型和復(fù)合型三種。
圖1. N-連接糖基化三種類型
然而，糖基化也可能帶來一些問題：
（1）糖基化會降低蛋白質(zhì)的均一性，影響蛋白質(zhì)的結(jié)晶；
（2）重組表達的糖蛋白和抗體糖型與人體內(nèi)糖型的差異可能引發(fā)免疫排斥反應(yīng)；
（3）異常糖基化可能導(dǎo)致自身免疫疾病的發(fā)生；
（4）登革熱病毒抗體的非巖藻糖化可能引起ADE效應(yīng)（抗體依賴性增強效應(yīng)）。
去糖基化的糖苷酶為科研工作者研究糖蛋白以及異常糖基化引發(fā)的相關(guān)疾病研究提供有效工具。但是不同的糖苷酶對底物有不同的偏好性，切對不同糖苷酶對糖鏈的切割效率也不同。那么各種糖苷酶都有什么特點呢，下面我們來詳細介紹一下。
PNGase F
PNGase F (YXX04901)是一種廣譜的N-連接糖鏈切割酶，不具有氨基酸序列特異性，可以高效切割高甘露糖型，雜合型和復(fù)合型三種糖鏈。連接在天冬酰胺上的第一個GlcNAc被巖藻糖通過α(1-6)糖苷鍵連接修飾時也可以高效切割，但是在植物和部分昆蟲細胞內(nèi)，巖藻糖修飾通過α(1-3)糖苷鍵連接時，則不能切割。由于PNGase F不識別特定的氨基酸序列，所以PNGase F能夠切割變性的蛋白，且切割變性蛋白糖鏈的效率一般比切割活性蛋白糖鏈的效率還要高。
圖2. PNGase F的糖鏈切割位點
Endo S
Endo S (YXX05201)是一種識別Human IgG Asn 297位點復(fù)合型糖鏈的糖苷內(nèi)切酶，切割位置為兩個GlcNAc之間。
圖3. Endo S的糖鏈切割位點
CU43
與Endo S類似，CU43 (YXX25001, EXX25001)也只能識別并切割Human IgG Asn 297位點的糖基，能高效切割雜合型和復(fù)合型兩種糖鏈，但是切割高甘露糖型糖鏈的效率較低。
圖4. CU43的糖鏈切割位點
Endo S2
Endo S2 (YXX06601)能切割Human IgG Asn297上的所有三種糖鏈，殘留一個GlcNAc (和一個巖藻糖，如果有巖藻糖修飾)在Asn297上。
圖5. Endo S2的糖鏈切割位點
注意
Endo S，CU43和Endo S2去糖基化高度依賴Human IgG的空間結(jié)構(gòu)，如果IgG變性，則無法切割。Endo S，CU43和Endo S2無法切除Human IgA, IgM，IgE和其他物種IgG的糖鏈。
下面以表格的形式總結(jié)四種糖苷酶的特點：
AntibodySystem
AntibodySystem Laboratories SAS于2019年創(chuàng)立于法國斯特拉斯堡,專注于生命科學(xué)研究領(lǐng)域蛋白及抗體試劑研發(fā)生產(chǎn)。致力于為全球生命科學(xué)基礎(chǔ)研究者提供高質(zhì)量的蛋白，抗體產(chǎn)品，產(chǎn)品類別囊括傳統(tǒng)多抗，經(jīng)典內(nèi)參抗體，標(biāo)簽抗體，高活性蛋白，invivo功能性抗體，低背景流式抗體，高特異性納米抗體，特色小分子抗體，高質(zhì)量磷酸化抗體，DNA/RNA抗體,PEG抗體等十余個系列;目前AntibodySystem旗下產(chǎn)品線涵蓋500余種病毒與超級細菌，寄生蟲，腫瘤，老年癡呆，帕金森，變態(tài)與過敏反應(yīng)，免疫抑制與免疫激活等多個領(lǐng)域。
佰樂博生物
武漢佰樂博生物（Biolab Reagents）由五位畢業(yè)于華中科技大學(xué)，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，武漢大學(xué)等知名高校，且具有二十年工作經(jīng)驗的生命科學(xué)領(lǐng)域研究者創(chuàng)立于2021年，憑借豐富的產(chǎn)品開發(fā)經(jīng)驗，利用全球技術(shù)平臺，引進和整合全球高品質(zhì)的蛋白、抗體和試劑盒產(chǎn)品。目前，佰樂博生物作為法國AntibodySystem和ProteoGenix在亞洲總代理，提供近30,000種生命科學(xué)試劑，核心產(chǎn)品涵蓋蛋白、抗體和試劑盒，旨在為科研工作者提供專業(yè)、全面、可靠的試劑支持，推動生命科學(xué)研究的深入發(fā)展。