"NCI-H295細(xì)胞：人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕?xì)胞】１)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無(wú)菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開(kāi)蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋?zhuān)玻氨稌r(shí)，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線(xiàn)繩，通過(guò)線(xiàn)繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉海梦艽荡蛑瞥杉?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱(chēng)和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過(guò)3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細(xì)胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專(zhuān)家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株，無(wú)法以其外觀分辨之；支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長(zhǎng)參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前，必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free，實(shí)驗(yàn)結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義；偵測(cè)出細(xì)胞株有支原體污染時(shí)，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細(xì)胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤(pán)如何保持清潔？定期(至少每?jī)芍芤淮? 以無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會(huì)偏暗紅色，且pH值會(huì)越來(lái)越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會(huì)逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時(shí)，可以通入無(wú)菌過(guò)濾之CO２，以調(diào)整pH值；購(gòu)買(mǎi)之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購(gòu)買(mǎi)之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞
H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
SKNBE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞
Calu-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細(xì)胞、OP-9細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
NK-92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞
OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞
Hep 3B2.1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞、BT-325細(xì)胞
Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
Mouse Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
NK-92.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞
MS 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞
MGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 115細(xì)胞、Hs675細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
HaCaT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
NCI-H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
FLC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞
P3-x63-Ag8 653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞、MV3細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
mIMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
PANC0403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-540細(xì)胞、RGE細(xì)胞、A704細(xì)胞
IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞
D10.G4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-126細(xì)胞、QGY-7703細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞
MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞
NB9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451細(xì)胞、A-9細(xì)胞、MPC11細(xì)胞
H-1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細(xì)胞、H1734細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
SACC83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、MLMA細(xì)胞、SF17細(xì)胞
SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞
IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
P31 FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB453細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞
BGC823細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞、MLMA細(xì)胞
LWnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
Evsa T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539細(xì)胞、U138細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
WILL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-128細(xì)胞、CORL279細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM19細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞、U937細(xì)胞
RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞
KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞
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