"NCI-H1522細(xì)胞:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:①進(jìn)無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí),應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點(diǎn)是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉,熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
G519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H747細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞
LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞
A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞
NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞
SK-NM-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞
H-345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞
HBZY 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞、REC1細(xì)胞
COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞
CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞
LoMeT-ccRcc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMCs細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞
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DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
Mono Mac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞
NCI-SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-2細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞、H-1417細(xì)胞
Hs888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 829細(xì)胞、Y79細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
EFM192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8-653細(xì)胞、HSC(Human Schwann)細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞
B-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320DM細(xì)胞、SaOS細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞
alpha TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細(xì)胞、H-1688細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
OCI-AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU398細(xì)胞、16HBE細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞
HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞
ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
KP-N-YN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、COV504細(xì)胞
HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞
Panc-05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1353細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞
BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞
SK HEP 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞
NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細(xì)胞、MESSA細(xì)胞、H-748細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞
CEM-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H35細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞
HEC-1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC939細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞、OVISE細(xì)胞
PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
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