雙熒光素酶驗(yàn)證MIRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點(diǎn)新聞專題
雙熒光素酶驗(yàn)證MIRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點(diǎn)應(yīng)用
雙螢光素酶是理想的報(bào)告基因,因?yàn)椴溉閯?dòng)物細(xì)胞中不含內(nèi)源性螢光素酶,一旦轉(zhuǎn)錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶。單報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)往往會(huì)受到各種實(shí)驗(yàn)條件的影響,而雙報(bào)告基因則通過共轉(zhuǎn)染的“對(duì)照”作為內(nèi)參為試驗(yàn)提供一基準(zhǔn)線,從而可以在最大程度上減小細(xì)胞活性和轉(zhuǎn)染效率等外在因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響,使得數(shù)據(jù)結(jié)果更為可信。Dual-Luciferase雙螢光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng)在細(xì)胞中同時(shí)表達(dá)螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶,兩者沒有種源同源性并對(duì)應(yīng)不同的反應(yīng)底物,故而沒有交叉干擾。利用雙螢光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)可以對(duì)miRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點(diǎn),轉(zhuǎn)錄因子和啟動(dòng)子結(jié)合位點(diǎn)提供驗(yàn)證服務(wù)。
2020/2/17 10:03:57
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