天堂网亚洲,天天操天天搞,91视频高清,菠萝蜜视频在线观看入口,美女视频性感美女视频,95丝袜美女视频国产,超高清美女视频图片

雙熒光素酶驗證MIRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點應(yīng)用

2020/2/17 10:03:57

雙熒光素酶驗證MIRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點背景[1]

雙螢光素酶是理想的報告基因,因為哺乳動物細胞中不含內(nèi)源性螢光素酶,一旦轉(zhuǎn)錄完成立刻就生成功能性的螢光素酶。單報告基因?qū)嶒炌鶗艿礁鞣N實驗條件的影響,而雙報告基因則通過共轉(zhuǎn)染的“對照”作為內(nèi)參為試驗提供一基準(zhǔn)線,從而可以在程度上減小細胞活性和轉(zhuǎn)染效率等外在因素對實驗的影響,使得數(shù)據(jù)結(jié)果更為可信。Dual-Luciferase雙螢光素酶報告基因檢測系統(tǒng)在細胞中同時表達螢火蟲螢光素酶和海腎螢光素酶,兩者沒有種源同源性并對應(yīng)不同的反應(yīng)底物,故而沒有交叉干擾。利用雙螢光素酶報告基因系統(tǒng)可以對miRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點,轉(zhuǎn)錄因子和啟動子結(jié)合位點提供驗證服務(wù)。

雙熒光素酶驗證MIRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點應(yīng)用[1]

由于miRNA主要通過作用于靶基因的3’UTR起作用,可以將目的基因3’UTR區(qū)域構(gòu)建至載體中報告基因luciferase的后面, 通過比較過表達或者干擾miRNA后,報告基因表達的改變(監(jiān)測螢光素酶的活性變化)可以定量反映miRNA對目的基因的抑制作用;結(jié)合定點突變等方法進一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點。實驗?zāi)康?  驗證hsa-mir-21與靶基因Tropomyosin 1 3’UTR是否發(fā)生作用并進一步確定hsa-mir-21與靶基因Tropomyosin 1 3’UTR的作用位點。

主要參考文獻

[1] 印翠,張俊玲,施志儀,孫文慧,孫近近。應(yīng)用于miRNA靶標(biāo)檢測的雙熒光素酶報告載體的構(gòu)建及鑒定?!渡锛夹g(shù)通報》2015年 第12期 。

免責(zé)申明 ChemicalBook平臺所發(fā)布的新聞資訊只作為知識提供,僅供各位業(yè)內(nèi)人士參考和交流,不對其精確性及完整性做出保證。您不應(yīng) 以此取代自己的獨立判斷,因此任何信息所生之風(fēng)險應(yīng)自行承擔(dān),與ChemicalBook無關(guān)。文章中涉及所有內(nèi)容,包括但不限于文字、圖片等等。如有侵權(quán),請聯(lián)系我們進行處理!
閱讀量:825 0

歡迎您瀏覽更多關(guān)于雙熒光素酶驗證MIRNA與靶目標(biāo)基因結(jié)合位點的相關(guān)新聞資訊信息