異硫氰酸熒光素酯，英文名為Fluorescein isothiocyanate，常溫常壓下為黃色至淺黃色固體粉末，它不溶于水但是可溶于常見的有機(jī)溶劑包括乙酸乙酯，二氯甲烷和氯仿等。異硫氰酸熒光素酯能與各種抗體蛋白結(jié)合，結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性，并在堿性溶液中仍有強(qiáng)烈綠色熒光，可對(duì)由地細(xì)菌病毒和寄生蟲等所致疾病進(jìn)行快速診斷，主要用于醫(yī)學(xué)，農(nóng)學(xué)和畜牧等方面。

圖1 異硫氰酸熒光素酯的性狀圖

特性

異硫氰酸熒光素酯的形態(tài)為黃色粉末，有吸濕性，是一種生化試劑，也是醫(yī)學(xué)診斷藥物，可對(duì)由地細(xì)菌病毒和寄生蟲等所致疾病進(jìn)行快速診斷。異硫氰酸熒光素酯有兩種異構(gòu)體，其中異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性與蛋白質(zhì)結(jié)合力等方面都更優(yōu)良。FITC分子量為389.4，最大吸收光波長(zhǎng)為490～495nm，最大發(fā)射光波長(zhǎng)為520～530nm，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年，是應(yīng)用最廣泛的熒光素。異硫氰酸熒光素酯的主要優(yōu)點(diǎn)是人眼對(duì)黃綠色較為敏感，通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。

化學(xué)應(yīng)用

異硫氰酸熒光素酯是生物學(xué)中應(yīng)用最為廣泛的一種綠色熒光素衍生物，異硫氰酸熒光素酯具有高吸收率和優(yōu)良的熒光量子產(chǎn)率等特點(diǎn)。異硫氰酸熒光素酯的異硫氰酸基團(tuán)可與蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團(tuán)相結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)包括抗體，凝集素在內(nèi)的蛋白標(biāo)記。FITC 除了用作蛋白質(zhì)標(biāo)記物，還可用作蛋白質(zhì)熒光示蹤劑，通過(guò)標(biāo)記抗體而快速鑒定病原體，或是用于蛋白質(zhì)和多肽（HPLC）的微量測(cè)序。異硫氰酸熒光素酯的最大激發(fā)波長(zhǎng)為 494 nm。一旦激發(fā)，在最大發(fā)射波長(zhǎng) 520 nm 處呈黃-綠色熒光。此外，異硫氰酸熒光素酯也是一種能誘發(fā)接觸超敏反應(yīng) (CHS) 的半抗原，并誘導(dǎo)特應(yīng)性皮炎模型。[1]

參考文獻(xiàn)

[1] 黃春保,慈云祥,常文保.異硫氰酸熒光素-牛血清白蛋白標(biāo)記物的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)[J].分析化學(xué),2002,30:3.