背景^{[1][2][3][4][5]}

Phospho-IRF3(Ser386)Rabbit Monoclonal Antibody（磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3兔單克隆抗體）是用磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3對兔進行系統(tǒng)免疫然后篩選出兔磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3致敏B細胞后與骨髓腫瘤細胞雜交最后制得既能產(chǎn)生單一抗體，又能無限增殖的雜種細胞系。干擾素調(diào)節(jié)因子3，也稱為IRF3，是干擾素調(diào)節(jié)因子。IRF3是干擾素調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子（IRF）家族的成員。IRF3最初發(fā)現(xiàn)作為同源物的IRF1和IRF2。IRF3已被進一步表征并顯示含有幾個功能結(jié)構域，包括核輸出信號，DNA結(jié)合結(jié)構域，C末端IRF結(jié)合結(jié)構域和幾個調(diào)節(jié)磷酸化位點。

IRF3以無活性的細胞質(zhì)形式存在，絲氨酸/蘇氨酸磷酸化形成與CREBBP的復合物。這種復雜的易位進入細胞核并激活干擾素α和β的轉(zhuǎn)錄，以及其他干擾素誘導的基因。IRF3在先天免疫系統(tǒng)對病毒感染的反應中起重要作用。聚合MAVS已經(jīng)發(fā)現(xiàn)激活IRF3二聚化。

最近的一項研究表明，先天性免疫接頭蛋白MAVS，STING和TRIF在保守的pLxIS基序上的磷酸化招募并指定了絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶TBK1的IRF3磷酸化和活化，從而限制了I型干擾素的產(chǎn)生。另一項研究表明，IRF3-/-敲除可以預防心肌梗死。同一項研究確定IRF3和I型IFN反應作為心肌梗死后的潛在治療靶點心臟保護作用。

研究應用^[6]

Phospho-IRF3(Ser386)Rabbit Monoclonal Antibody（磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3兔單克隆抗體）可用于研究LXRα通過下調(diào)IRF3、GRIP1負性調(diào)控Kupffer細胞中LPS誘導的炎癥反應機制。

方法：通過觀察肝X受體α(LXRα)激動劑對脂多糖(LPS)刺激后Kupffer細胞干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)、糖皮質(zhì)激素受體反應蛋白1(GRIP1)、LXRα表達的影響,探討LXRα負性調(diào)控炎癥反應的相關機制。方法采用膠原酶原位灌注法分離和培養(yǎng)雄性KM小鼠肝臟中的Kupffer細胞,所得細胞在含20%小牛血清和1%青霉素/鏈霉素的1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)。將分離的Kupffer細胞隨機分為4組:空白對照組、TLR4配體激活劑LPS(1μg/ml)組、LXRα配體激活劑T0901317(5μg/ml)組、LPS和T0901317共同處理組。收集培養(yǎng)細胞,采用Western boltting法檢測Kupffer細胞的LXRα、GRIP1及IRF3蛋白表達水平。ELISA檢測Kupffer細胞培養(yǎng)上清液中干擾素(IFN)β、腫瘤壞死因子(TNF)-α和白細胞介素(IL)-1β含量。

結(jié)果LXRα蛋白質(zhì)表達水平在T0901317處理組最高,LPS處理組最低。聯(lián)合處理組中,LXRα表達明顯低于T0901317處理組(P<0.05),但又顯著高于其他兩組(P<0.05)。IRF3及GRIP1蛋白表達量在LPS組最高,聯(lián)合處理組表達明顯降低,兩組間均有顯著差異(P<0.05);在LPS組及聯(lián)合處理組中,IRF3及GRIP1蛋白表達量均高于對照組及T0901317處理組(P<0.05)。

IFNβ在LPS處理組的含量較對照組和T0901317處理組明顯增高(P<0.05);聯(lián)合處理組IFNβ含量比LPS處理組明顯降低(P<0.05);IFNβ表達T0901317處理組表達最低。TNF-α在LPS處理組的含量較其他3組明顯增高(P<0.05);對照組、T0901317處理組和聯(lián)合處理組水平較低,且他們3組之間無明顯差別(P>0.05)。IL-1β的表達趨勢與TNF-α相同。結(jié)論在應用LPS處理之前預防性應用LXRα激動劑,能明顯抑制Kupffer細胞的IRF3及GRIP1表達,通過抑制IRF3、GRIP1的表達而發(fā)揮抗炎效應,從而抑制LPS所誘導的Kupffer細胞活化。

參考文獻

[1] Hiscott J,Pitha P,Genin P,Nguyen H,Heylbroeck C,Mamane Y,Algarte M,Lin R(1999)."Triggering the interferon response:the role of IRF-3 transcription factor".J.Interferon Cytokine Res.19(1):1–13.doi:10.1089/107999099314360.PMID 10048763.

[2] Lin R,Heylbroeck C,Genin P,Pitha PM,Hiscott J(Feb 1999)."Essential Role of Interferon Regulatory Factor 3 in Direct Activation of RANTES Chemokine Transcription".Mol Cell Biol.19(2):959–66.doi:10.1128/MCB.19.2.959.PMC 116027.PMID 9891032.

[3] Yoneyama M,Suhara W,Fujita T(2002)."Control of IRF-3 activation by phosphorylation".J.Interferon Cytokine Res.22(1):73–6.doi:10.1089/107999002753452674.PMID 11846977.

[4] Collins SE,Noyce RS,Mossman KL(Feb 2004)."Innate Cellular Response to Virus Particle Entry Requires IRF3 but Not Virus Replication".J Virol.78(4):1706–17.doi:10.1128/JVI.78.4.1706-1717.2004.PMC 369475.PMID 14747536.

[5] Hou F,Sun L,Zheng H,Skaug B,Jiang QX,Chen ZJ(Aug 5,2011)."MAVS Forms Functional Prion-Like Aggregates To Activate and Propagate Antiviral Innate Immune Response".Cell.146(3):448–61.doi:10.1016/j.cell.2011.06.041.PMC 3179916.PMID 21782231.

[6] LXRα通過下調(diào)IRF3、GRIP1負性調(diào)控Kupffer細胞中LPS誘導的炎癥反應機制[J].歐志兵,黃慶勇,孫科,魏思東,龔建平,涂兵.南方醫(yī)科大學學報.2009(05)