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薄層層析硅膠板的原理與使用方法

2023/3/11 10:46:35 作者:谷雨

薄層層析是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),屬固-液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn),一方面適用于少量樣品(幾到幾毫克,甚至0.01毫克)的分離,另一方面再制作薄層板時(shí),把吸附層加厚加大,又可用來(lái)精致樣品,此法特別適用于發(fā)揮性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物質(zhì)。在此過(guò)程中要用到薄層層析硅膠板。

薄層層析硅膠板.png

薄層層析硅膠板的原理

薄層色譜是吸附色譜,在展開(kāi)過(guò)程中,利用各組分在兩相之間發(fā)生多次吸附-解吸附平衡,吸附強(qiáng)的組分隨展開(kāi)劑移動(dòng)慢,吸附弱的組分隨展開(kāi)劑移動(dòng)快,一段時(shí)間后,各組分被分離,各組分在薄層板上形成不同距離的斑點(diǎn)。

溶劑的選擇

層析過(guò)程中溶劑的選擇,對(duì)組分分離關(guān)系極大。在柱層析時(shí)所用的溶劑(單一劑或混合溶劑)習(xí)慣上稱洗脫劑,用于薄層或紙層析時(shí)常稱展開(kāi)劑。洗脫劑的選擇,須根據(jù)被分離物質(zhì)與所選用的吸附劑性質(zhì)這兩者結(jié)合起來(lái)加以考慮。

在用極性吸附劑進(jìn)行層析時(shí),當(dāng)被分離物質(zhì)為弱極性物質(zhì),一般選用弱極性溶劑為洗脫劑;被分離物質(zhì)為強(qiáng)極性成分,則須選用極性溶劑為洗脫劑。如果對(duì)某一極性物質(zhì)用吸附性較弱的吸附劑(如以硅藻土或滑石粉代替硅膠),則洗脫劑的極性亦須相應(yīng)降低。

薄層層析硅膠板的應(yīng)用

(1)定性鑒別;

(2)藥品的質(zhì)量控制和雜質(zhì)檢查;

(3)化學(xué)反應(yīng)進(jìn)程的控制;

(4)柱色譜分離條件的探索。

使用方法

在柱層操作時(shí),被分離樣品在加樣時(shí)可采用干法,亦可選一適宜的溶劑將樣品溶解后加入。溶解樣品的溶劑應(yīng)選擇極性較小的,以便被分離的成分可以被吸附。然后漸增大溶劑的極性。這種極性的增大是一個(gè)十分緩慢的過(guò)程,稱為“梯度洗脫”,使吸附在層析柱上的各個(gè)成分逐個(gè)被洗脫。

如果極性增大過(guò)快(梯度太大),就不能獲得滿意的分離。溶劑的洗脫能力,有時(shí)可以用溶劑的介電常數(shù)(ε)來(lái)表示。介電常數(shù)高,洗脫能力就大。以上的洗脫順序僅適用于極性吸附劑,如硅膠、氧化鋁。對(duì)非極性吸附劑,如活性炭,則正好與上述順序相反,在水或親水住溶劑中所形成的吸附作用,較在脂溶性溶劑中為強(qiáng)。

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