背景及概述^[1][2]

黃藤為防己科植物黃藤Fibraurea recisa 的干燥藤莖，又名天仙藤、土黃連、金鎖匙、藤黃連等，主要分布在我國(guó)的云南、廣西、廣東等地以及越南、柬埔寨、緬甸，是當(dāng)?shù)厣贁?shù)民族常用的中藥和天然染料，并且由于人們大肆采集，導(dǎo)致供不應(yīng)求，不得不走向人工培植的方向。黃藤多生長(zhǎng)在海撥180 ～ 1 000 m的陰濕而肥沃的熱帶、亞熱帶密林中，常攀援高大藤本植物。黃藤始載于《本草綱目》，“黃藤生嶺南，狀若防己，俚人常服此藤，縱飲食有毒，亦自然不發(fā)。氣味甘苦平無毒”?，F(xiàn)收載于2015 年版《中國(guó)藥典》，其味苦，性寒歸心、肝經(jīng)，具有清熱解毒、瀉火通便的功效，而且能夠防治多種感染性疾病，如婦科炎癥，外科感染，菌痢，腸炎，呼吸道感染，眼結(jié)膜炎等。近年來，由于中藥黃藤資源日益匱乏，其化學(xué)成分研究處于停滯狀態(tài)，藥理作用則側(cè)重于黃藤素的抗炎、抑菌上，雖證明黃藤素的藥理活性較好，但是對(duì)于其作用機(jī)制尚缺乏相應(yīng)的深入研究。

藥理作用及應(yīng)用^[3]

黃藤素是黃藤中所含的主要化學(xué)成分，也是其主要的有效成分之一，黃藤素片在2000 年已被《中國(guó)藥典》收載，其有效性和安全性已得到充分的保證。因此國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)于黃藤的藥理研究主要集中在黃藤素上，對(duì)其進(jìn)行了深入系統(tǒng)的研究，并且取得了大量的研究成果。

1.抑菌活性

采用微量稀釋法的研究方法表明黃藤的根皮部、髓部、藤莖的三氯甲烷、甲醇提取物具有比較相近的抑菌活性，其抑菌圈均為10～20 mm。最小抑菌濃度(MIC) 值平均在80～640 mg/L，其中，單體化合物8-羥基羅默堿與氟康唑合用后能顯著的降低氟康唑和8-羥基羅默堿的用藥劑量，并且呈現(xiàn)出協(xié)同抑菌的作用。這顯示黃藤所含化學(xué)成分具有較好的抗深部真菌活性，可以作為抗真菌藥物的候選藥，并且已經(jīng)在臨床上使用的黃藤素也表明黃藤中的化學(xué)成分具有潛在的抑菌潛力。研究中草藥荷葉、黃連根、黃藤、十大功勞中分別提取出的荷葉堿、黃連素、黃藤素、異漢防己堿對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌活性時(shí)發(fā)現(xiàn)，黃藤素對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌效果優(yōu)于黃連素、荷葉堿和異漢防己堿。

2.抗炎作用于

研究發(fā)現(xiàn)，合成黃藤素和天然黃藤素均可提高正常小鼠的碳粒廓清指數(shù)，對(duì)小鼠的碳粒廓清指數(shù)沒有顯著的差異，這表明二者都能增強(qiáng)小鼠的非特異性免疫，都具有明顯的抗炎免疫功能。此外研究還表明合成黃藤素和天然黃藤素具有明顯的抗炎作用，對(duì)角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹、大鼠棉球肉芽腫和二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用，且研究發(fā)現(xiàn)二者藥效未見明顯的差異。通過體外測(cè)試發(fā)現(xiàn)黃藤素具有體外抗陰道毛滴蟲的作用，不同時(shí)間的抑制率的變化值與藥物濃度呈現(xiàn)出良好的線性相關(guān)性。與已知療效的陽性藥甲硝唑相比，其抑制陰道毛滴蟲的活性與甲硝唑相當(dāng)，這說明黃藤素是一類理想的抗陰道毛滴蟲的候選藥，具有廣闊的開發(fā)利用前景。對(duì)黃藤素膠囊對(duì)慢性子宮內(nèi)膜炎的臨床療效進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)患者在給予一定量的黃藤素膠囊1 周內(nèi)血量明顯減少，2 周后基本已經(jīng)沒有陰道流血，痊愈率達(dá)到了86. 67%，這表明黃藤素膠囊能夠治療慢性子宮內(nèi)膜炎，極具臨床推廣的意義。

3.增強(qiáng)免疫作用

研究表明黃藤素腹腔注射能夠增強(qiáng)白細(xì)胞吞噬功能的作用，提高了大鼠外周血中性粒細(xì)胞吞噬率、脾玫瑰花形成細(xì)胞百分率、酸性α-醋酸萘酯酶陽性百分率，并且促進(jìn)了白細(xì)胞移行抑制試驗(yàn)。這表明黃藤素能夠提高大鼠的非特異性免疫、細(xì)胞免疫及體液免疫功能。

4.其他吳坤

研究發(fā)現(xiàn)不同濃度的黃藤乙醇提取物均能夠抑制人增生性癱痕成纖維細(xì)胞增殖，改變成纖維細(xì)胞形態(tài)，并呈劑量依賴性，且質(zhì)量濃度在300 mg/L以下無明顯的細(xì)胞毒作用。黃藤素是一種異喹啉類生物堿，研究表明其具有抗糖尿病和抗氧化等多種藥理作用。研究發(fā)現(xiàn)給予有認(rèn)知功能障礙的糖尿病大鼠一定量的黃藤素，服用6 周后能有效改善糖尿病大鼠的認(rèn)知功能障礙，提高大鼠的認(rèn)知能力。研究表明黃藤素能夠抑制西尼羅病毒NS2B-NS3 蛋白的活性，并且也能夠劑量依賴性的抑制黃熱病毒和登革病毒，這為黃藤素應(yīng)用于診斷治療黃熱病毒感染提供了較為全面的理論基礎(chǔ)。從黃藤中提取的藥根堿具有一定的殺瘧原蟲活性，尤其對(duì)惡性瘧原蟲的殺傷力更強(qiáng)。研究表明黃藤素能夠松弛小鼠動(dòng)脈血管平滑肌，且具有一定的濃度依賴性，深入研究表明松弛作用與胞質(zhì)Ca2 + 下降有關(guān)。

制備 ^[2]

以鹽酸小檗堿為原料，經(jīng)路易斯酸裂解開環(huán)得到開環(huán)產(chǎn)物三羥基鹽酸小檗堿和四羥基鹽酸小檗堿的混合物，再用甲基化試劑使開環(huán)產(chǎn)物甲基化得到黃藤素堿，最后用鹽酸成鹽得到鹽酸黃藤素。結(jié)果與結(jié)論采用的制備方法操作簡(jiǎn)便、收率較高( 66%)，純度達(dá)到99. 3% ( HPLC) 。

提取^[1]

天然黃藤素主要從防已科植物黃藤的干燥藤莖中提取獲得。黃藤素是黃藤的主要藥效成分之一，主要化學(xué)成分為巴馬汀，黃藤干燥藤莖中黃藤素含量以鹽酸巴馬汀計(jì)超過2.0％以上，天然黃藤素含量較為豐富。從黃藤中高效率分離黃藤素，獲取較高產(chǎn)量和較高純度的天然黃藤素是工藝學(xué)研究的一個(gè)重要內(nèi)容。黃藤素屬生物堿類，提取黃藤素大多先以酸水作為溶媒提取該類生物堿成分，然后利用其鹽溶解度的差異，調(diào)節(jié)pH 對(duì)提取液進(jìn)行鹽析，得到黃藤粗堿，粗堿經(jīng)結(jié)晶法精制后得到黃藤素。有研究比較了煎煮法和冷浸法對(duì)黃藤中巴馬汀成分提取的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，酸水煎煮法提取巴馬汀的提取率要比冷浸法高1.5倍。分析不同pH 及鹽析NaCl用量對(duì)黃滕中黃藤素提取率的影響，并比較了黃藤根與黃藤莖中黃藤素含量的差異，結(jié)果表明，在NaCl用量相同時(shí)，酸水浸液調(diào)pH8時(shí)的粗堿提取率始終大于pH9時(shí)，黃藤根和黃藤莖中黃藤素提取率分別為1.72％、1.85％，黃藤莖中黃藤素含量高于黃藤根。采用正交設(shè)計(jì)法和平行試驗(yàn)法對(duì)黃藤素提取工藝條件進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，pH 對(duì)黃藤素的提取率有極顯著影響，浸泡時(shí)間、提取次數(shù)和NaCl用量對(duì)提取率有顯著影響，優(yōu)化后的理想工藝為：黃藤粉碎后用0.2％ H2SO4溶液浸泡4次，第1次48H，之后每次浸提24H，提取液用NaOH 調(diào)pH10，靜置沉淀除雜，濾液加7％ NaCl鹽析，靜置24H，過濾，沉淀干燥得粗堿；粗堿粉碎用80％酒精按1∶5比例提取3次，提取液用HCl調(diào)pH2，冷卻結(jié)晶得黃藤素精品；按此工藝黃藤素提取率可達(dá)2.25％。

檢測(cè)^[1]

充分利用現(xiàn)代分析檢測(cè)設(shè)備，研究與建立科學(xué)、靈敏、特異、快速的黃藤素檢測(cè)技術(shù)與方法，是進(jìn)行黃藤素新產(chǎn)品研發(fā)的必要途徑，是實(shí)現(xiàn)藥品質(zhì)量可控性的有力保證，也是展開藥代動(dòng)力學(xué)等更深層次研究的重要技術(shù)手段。目前，高效液相色譜法（HPLC）已逐步成為黃藤素鹽酸巴馬汀含量測(cè)定或制劑質(zhì)量控制最主要的技術(shù)方法。利用HPLC測(cè)定黃藤素片中鹽酸巴馬汀的含量，流動(dòng)相為乙腈―緩沖液（0.05mol/L磷酸二氫鉀和0.05mol/L庚烷磺酸鈉，1∶1）（50∶50），檢測(cè)波長(zhǎng)為272ｎm，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，鹽酸巴馬汀在8.032～40.160μg/mL范圍內(nèi)濃度與峰面積呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為99.5％，RSD為1.0％（n＝9）。

主要參考資料

[1] 趙武, 陸榮寶, 劉偉, 等. 黃藤素研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī), 2014, 41(5): 267-271.

[2] 岳靜, 王虹, 張英, 等. 黃藤素的合成工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制[J]. 中國(guó)藥物化學(xué)雜志, 2015, 25(6): 453-456.

[3] 黃藤的研究進(jìn)展