背景及概述[1][2]
妊娠相關蛋白A(PAPPA) 由胎盤合體滋養(yǎng)層和蛻膜細胞分泌,是一種與妊娠相關的大分子糖蛋白,主要存在于孕婦血清中。孕早期低水平的PAPPA與高危妊娠、胎兒早產(chǎn)和胎兒染色體異常有關。PAPPA早在20 世紀70 年代由國外學者于孕婦血清中分離得出,該物質(zhì)產(chǎn)生于胎盤組織x 細胞及滋養(yǎng)細胞,是一種與胰島素樣生長因子相關的金屬鰲合蛋白酶,屬于基質(zhì)金屬蛋白酶鋅醋多膚超家族成員。
該蛋白由2 個經(jīng)二硫鍵結(jié)合的等比例分子量在(200~ 250) x103 的亞基與2 個嗜酸性粒細胞堿性蛋白前體組成,但上述二硫鍵能夠在裂解或竣基甲基化時打開,從而產(chǎn)生PAPPA與P or MBP 兩個亞基。以往的研究中多認為PAPPA 與妊娠具有密切聯(lián)系,且在高危妊娠監(jiān)護、唐氏綜合征和妊娠滋養(yǎng)細胞疾病等的診斷中具有重要臨床價值。
上世紀末期有研究發(fā)現(xiàn),PAPPA 具有水解胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白的活性,且該活性具有胰島素依賴性。近年來的相關研究表明,PAPPA 在高血壓、冠心病等心血管疾病的生發(fā)展中也起到了一定作用。關于其與妊娠高血壓綜合征之間的關系,目前相關研究相對較少。D多克隆抗體系一種特性復雜、親和性廣泛、含多種型別及多種亞型的免疫球蛋白。此種抗體由非同一細胞株B淋巴細胞產(chǎn)生的,此抗體分子結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、功能不一。
對多種抗原發(fā)生免疫反應,對增強機體非特異性免疫力有意義。一分子蛋白質(zhì)激素的表面存在多個不同的抗原決定簇,可同B淋巴細胞表面的相應受體結(jié)合。一個B淋巴細胞表面只能和一個抗原決定簇結(jié)合。
一個靜止的B細胞與抗原決定簇結(jié)合后即被活化并增殖和分化為一群合成和分泌抗相應抗原決定簇抗體的漿細胞,這一群細胞稱為一個克隆。用經(jīng)典動物免疫法得到的抗血清中含有多種由不同克隆產(chǎn)生的、抗不同抗原決定簇的抗體,稱為PCAb。自身免疫性內(nèi)分泌疾病患者血清中存在的抗某一自身抗原例如甲狀腺過氧化物酶等的抗體,也可具有多克隆性質(zhì),也可稱為多克隆抗體。
兔抗PAPPA-AS1多克隆抗體可識別人、小鼠、大鼠等種屬來源樣本的兔抗PAPPA-AS1多克隆抗體蛋白。該抗體2-8℃可保存6個月。長期保存請分裝后放于 -20℃ ,避免反復凍融。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存,長期不使用可以考慮-20℃保存,但凍融可能會導致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。兔抗PAPPA-AS1多克隆抗體可用于WB、IF、 IHC、ICC、 FC,不同應用濃度不同。
如果兔抗PAPPA-AS1多克隆抗體Western blot (WB)、免疫熒光(IF)、免疫細胞化學(ICC)等實驗,請注意回收使用過的稀釋抗體?;厥盏目贵w通常至少可以重復使用5-10次。稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,請4℃保存?;厥蘸笾貜褪褂玫目贵w,使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
主要參考資料
[1]中華醫(yī)學百科大辭海
[2] 龔源, 陳曉輝, 張純萍. 妊娠相關血漿蛋白 A 與妊娠高血壓綜合征的相關性研究[J]. 海南醫(yī)學, 2016, 27(6): 994-995,996.