背景^[1][2]

單克隆抗體技術(shù)起源于Kohler等創(chuàng)建的體外鼠源雜交瘤技術(shù)。經(jīng)多年研究，鼠單抗已從單純的生物實驗室科研及臨床診斷發(fā)展到治療性抗體藥物。但鼠單抗的主要缺陷是小鼠免疫系統(tǒng)不能識別某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠單抗的親和性不如兔來源抗體的親和性高。然而由于沒有發(fā)現(xiàn)兔源性的漿細胞瘤及病毒體外轉(zhuǎn)染兔B細胞的技術(shù)困難，直到1995年在c-myc/v-abl轉(zhuǎn)基因兔身上成功地獲得了兔漿細胞瘤細胞系，得到了穩(wěn)定的兔-兔雜交瘤，才使兔單克隆抗體技術(shù)有了突破性進展。

近年兔單克隆抗體技術(shù)日臻完善，目前商品化的兔單抗已達數(shù)千種。Bcl10 命名為B cell lymphoma/leukemia 10，其中 Bcl 代表 B 細胞淋巴瘤或者白血病，而且通常在染色體易位引起的疾病中發(fā)現(xiàn)。但它與其他的 Bcl 蛋白沒有同源性，如包括調(diào)節(jié)細胞周期的 Bcl1/Cyclin D1 蛋白和抗凋亡的 Bcl2 蛋白。

Bcl10 碼一種有 233 個氨基酸的蛋白質(zhì)。包含一個 CARD 結(jié)構(gòu)域，該 CARD由 6 個緊密壓縮的α一螺旋組成，類似于“死亡結(jié)構(gòu)域’，在其他凋亡調(diào)節(jié)蛋白中也可見；C 端是一個富含絲氨酸和蘇氨酸功能域。它與馬皰疹病毒的 E10 基因有高度的同源性（CARD 結(jié)構(gòu)域中 97 個氨基酸內(nèi)有 47%相同和 24.7%的相似性），E10 蛋白在 C 端有一個恒質(zhì)序列位點（Cys Cys），皰疹病毒 E10 蛋白通過這個恒質(zhì)序列共價修飾質(zhì)膜上的磷脂分子，誘導(dǎo)磷酸化，招驀 CARD 相關(guān)蛋白，激活NF- κB 。

Bcl 10兔單克隆抗體可用于檢測總Bcl10蛋白的內(nèi)源性水平，反應(yīng)物種可為人類，小鼠，大鼠，Bcl 10兔單克隆抗體是通過用對應(yīng)于Bcl10的Ser60周圍的殘基的合成肽免疫動物而產(chǎn)生的。

應(yīng)用

1. 在生物標(biāo)記物開發(fā)中的應(yīng)用

兔單克隆抗體包括Bcl 10兔單克隆抗體廣泛用于生命科學(xué)研究的各個領(lǐng)域，尤其在免疫組織化學(xué)以及檢測蛋白的轉(zhuǎn)譯后修飾方面具有獨特優(yōu)勢。至今已有100多種兔單克隆抗體開發(fā)用于癌癥的IHC臨床診斷與研究，其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC診斷試劑盒。在蛋白修飾研究領(lǐng)域，如蛋白的磷酸化，在與疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)信號通路中起到了至關(guān)重要的作用，使用磷酸化蛋白的兔單克隆抗體可以非常清楚地顯示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多種磷酸化特異性的兔單克隆抗體面世。

2. 在治療抗體藥物開發(fā)中的應(yīng)用

臨床使用的大多數(shù)治療用抗體均需經(jīng)體外親和力成熟這一步驟，以提高抗體的親和力。這一過程常需8至12個月，最終親和力在納摩爾級(10-9 mol/L)。兔單抗不需使用體外親和力成熟，就能達到10-11至10-13 mol/L。這種高親和力不僅減少抗體的臨床使用量，還能減少由于使用大量抗體帶來的副作用。但這種高親和力的優(yōu)勢還需在動物和臨床試驗中進一步證實。

另外，與鼠單抗的人源化相比，兔單克隆抗體的人源化更容易。因為，兔單克隆抗體主要由一種重鏈及輕鏈基因構(gòu)成，通過分析大量的兔單克隆抗體序列發(fā)現(xiàn)，兔與人的抗體同源性更高，約60%～76%，而小鼠與人的抗體同源性略低，為57%～72%，說明用兔單克隆抗體開發(fā)藥物前景更廣闊。

主要參考資料

[1] 李婷婷, 崔慧斐. 兔單克隆抗體的發(fā)展及應(yīng)用前景[J]. 食品與藥品, 2012, 14(9): 373-376. 

[2] 鄭勇. Bcl10 轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究和抗 Bcl10~+ 腫瘤藥物的篩選[D]. 武漢大學(xué), 2006.