背景[1-3]
磷酸化鉀通道蛋白DRK1抗體是可以特異性結(jié)合磷酸化鉀通道蛋白DRK1的一類多克隆抗體，主要用于體外檢測磷酸化鉀通道蛋白DRK1的表達(dá)水平。
磷酸化鉀通道蛋白DRK1屬于鉀通道家族蛋白的一個亞型，它在缺血神經(jīng)元中的表達(dá)是增高的;此外,它的活性與其酪氨酸磷酸化水平相關(guān),在其氨基末端的酪氨酸殘基經(jīng)酪氨酸激酶磷酸化后可顯著降低其介導(dǎo)的電流的幅度。
磷酸化鉀通道蛋白DRK1免疫組化圖
通道蛋白（channel protein）是橫跨質(zhì)膜的親水性通道，允許適當(dāng)大小的離子順濃度梯度通過，包括離子通道、孔蛋白、水孔蛋白。有些通道蛋白形成的通道通常處于開放狀態(tài)，如鉀泄漏通道（leak channels，也叫“resting potassium channels"），允許鉀離子不斷外流。有些通道蛋白平時處于關(guān)閉狀態(tài)，即“門”不是連續(xù)開放的，僅在特定刺激下才打開，而且是瞬時開放瞬時關(guān)閉，在幾毫秒的時間里，一些離子、代謝物或其他溶質(zhì)順著濃度梯度自由擴(kuò)散通過細(xì)胞膜，這類通道蛋白又稱為門通道（gated channel）。
通道蛋白可以是單體蛋白,也可以是多亞基組成的蛋白,它們都是通過疏水的氨基酸鏈進(jìn)行重排,形成水性通道。通道蛋白本身并不直接與小的帶電荷的分子相互作用,這些小的帶電荷的分子可以自由的擴(kuò)散通過由脂雙層中膜蛋白帶電荷的親水區(qū)所形成的水性通道。通道蛋白的運輸作用具有選擇性,所以在細(xì)胞膜中有各種不同的通道蛋白。通道蛋白參與的只是被動運輸,在運輸過程中并不與被運輸?shù)姆肿咏Y(jié)合,也不會移動,并且是從高濃度向低濃度運輸,所以運輸時不消耗能量。
應(yīng)用[4][5]
用于電壓門控性鉀通道亞型Kv1.5、Kv2.1在高原慢性低壓低氧性肺動脈高壓形成和恢復(fù)中的作用研究
研究電壓門控性鉀通道（Kv）亞型Kv1.5、Kv2.1基因表達(dá)變化在大鼠高原慢性低壓低氧性肺動脈高壓形成以及恢復(fù)中的作用;Kv1.5、Kv2.1亞型表達(dá)變化與肺動脈重構(gòu)的關(guān)系;觀察二氯醋酸鈉對Kv1.5、Kv2.1表達(dá)的上調(diào),抑制肺動脈重構(gòu)和降低高原低氧性肺動脈高壓的作用。
方法32只雄性SD大鼠均分為正常對照組、模擬高原慢性低壓低氧組（CH組）、二氯醋酸鈉（DCA）治療組（CH+DCA組）和高原低氧返回平原恢復(fù)7 d組（CHR7）。正常對照組在常壓常氧平原條件下喂養(yǎng),其余各組在模擬高原5000 m低壓氧艙內(nèi)喂養(yǎng)21d,動物模型建成后用閉式胸腔法測平均肺動脈壓（mPAP）,圖像分析技術(shù)分析肺小動脈平滑肌管壁厚度、肺小動脈直徑、管壁面積和血管總面積,計算管壁厚度占血管外徑的百分比（WT%）,管壁面積占血管總面積的百分比（WA%）。
實時熒光定量PCR法檢測四組大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞（PASMCs）的Kv1.5,Kv2.1 mRNA水平;免疫組織化學(xué)方法檢測大鼠PASMCs Kv1.5、Kv2.1的蛋白表達(dá),并用圖像分析技術(shù)半定量分析肺小動脈Kv1.5、Kv2.1表達(dá)強(qiáng)度變化;Western blot法檢測肺動脈平滑肌細(xì)胞Kv1.5、Kv2.1蛋白表達(dá)。
參考文獻(xiàn)
[1]Pergolide Is an Inhibitor of Voltage-Gated Potassium Channels,Including Kv1.5,and Causes Pulmonary Vasoconstriction[J].Zhigang Hong,Andrew J.Smith,Stephen L.Archer,Xi-Chen Wu,Daniel P.Nelson,Douglas Peterson,Gerhard Johnson,E Kenneth Weir.Circulation.2005(10)
[2]Efficacy of Dichloroacetate as a Lactate-Lowering Drug[J].Peter W.Stacpoole,Nelamangala V.Nagaraja,Alan D.Hutson.The Journal of Clinical Pharmacology.2003(7)
[3]Role of K+channels in pulmonary hypertension[J].Mehran Mandegar,Jason X.-J Yuan.Vascular Pharmacology.2002(1)
[4]Oxygen Sensitivity of Cloned Voltage-Gated K+Channels Expressed in the Pulmonary Vasculature[J].Joanne T.Hulme,Elizabeth A.Coppock,Antonio Felipe,Jeffery R.Martens,Michael M.Tamkun.Circulation Research.1999(6)
[5]徐賢華.電壓門控性鉀通道亞型Kv1.5、Kv2.1在高原慢性低壓低氧性肺動脈高壓形成和恢復(fù)中的作用[D].第三軍醫(yī)大學(xué),2010.