背景[1-3]
神經(jīng)元核抗原抗體是以神經(jīng)元核為抗原多克隆抗體，可以特異性結(jié)合神經(jīng)元核。神經(jīng)元核抗原抗體主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等神經(jīng)元核檢測實(shí)驗(yàn)。
抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇（表位）和抗體超變區(qū)分子間的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性與親和性。這種特性是由抗原、抗體分子空間構(gòu)型所決定的。除兩者分子構(gòu)型高度互補(bǔ)外，抗原表位和抗體超變區(qū)必須密切接觸，才有足夠的結(jié)合力。
神經(jīng)核：在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，形態(tài)和功能相似的神經(jīng)元胞體及其樹突聚集在一起形成的灰質(zhì)團(tuán)塊，稱為神經(jīng)核。
在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)由功能相同的多個(gè)神經(jīng)細(xì)胞體集聚在一起而形成的集團(tuán)，叫神經(jīng)核。人體中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)有很多神經(jīng)核，其中最重要的有發(fā)出12對(duì)腦神經(jīng)的神經(jīng)核和基底神經(jīng)核等。各神經(jīng)核有特殊的生理功能，如發(fā)生病變，則有明顯的臨床體征。
腦神經(jīng)核團(tuán)的神經(jīng)元胞體集群于腦干和脊髓頸段，因神經(jīng)元的類型或神經(jīng)纖維包繞程度的差異而得以與其附近的神經(jīng)元群相區(qū)分。
運(yùn)動(dòng)核團(tuán)：動(dòng)眼神經(jīng)核（軀體運(yùn)動(dòng)）、滑車神經(jīng)核、三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核、展神經(jīng)核、面神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核、疑核、舌下神經(jīng)核。
感覺核團(tuán)：三叉神經(jīng)中腦核、三叉神經(jīng)感覺主核。
副交感核：動(dòng)眼神經(jīng)副交感核（內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)）、上涎核和下涎核、迷走神經(jīng)背核。
特殊感覺核：前庭神經(jīng)核、耳蝸神經(jīng)前、后核、孤束核。
應(yīng)用[4][5]
用于核膜BK通道調(diào)節(jié)神經(jīng)元核鈣依賴性的基因表達(dá)及樹突分支研究
研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)元核膜BK通道通過影響細(xì)胞核周隙的鈣離子釋放,調(diào)節(jié)CaMKIV依賴性的細(xì)胞核鈣離子信號(hào)通路,進(jìn)而調(diào)控神經(jīng)元活動(dòng)誘導(dǎo)的CREB轉(zhuǎn)錄因子的活化,以及下游靶基因的表達(dá),并且影響了神經(jīng)元樹突分支。
1. 核膜BK通道通過CaMKIV依賴性的細(xì)胞核鈣離子信號(hào)通路調(diào)節(jié)CREB的磷酸化。前期的研究工作提示核膜BK通道能夠調(diào)節(jié)CREB轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄活性,并且這一作用可能是通過控制細(xì)胞核鈣離子濃度來實(shí)現(xiàn)的。
2. 于是首先探討了核膜BK通道是否通過細(xì)胞核鈣離子信號(hào)通路來調(diào)控CREB轉(zhuǎn)錄活性。CREB的轉(zhuǎn)錄活性受到兩條鈣離子依賴的信號(hào)通路的調(diào)控,一條是Ca/calmodulin(CAM)-dependent protein kinases通路,特別是定位于細(xì)胞核內(nèi)的CaM kinaseⅣ(CaMKⅣ),另一條是MAP kinase/extracellular signal-regulated kinase(ERK)信號(hào)通路。
BK通道的特異性阻斷劑paxilline處理分離的神經(jīng)元細(xì)胞核后,用免疫印跡法檢測到CREB與CaMKIV磷酸化程度比對(duì)照組增強(qiáng),而ERK的磷酸化沒有發(fā)生改變。這提示CaMKIV通路可能介導(dǎo)了核膜BK通道對(duì)CREB的轉(zhuǎn)錄活性的調(diào)控作用。
為了排除paxilline可能存在的非特異性作用給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來假陽性,同時(shí)在BK通道基因敲除(Kcnmal-/-)小鼠的神經(jīng)元細(xì)胞核上平行做了以上實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示,在Kcnmal-/-小鼠的神經(jīng)元細(xì)胞核,paxilline既沒有改變CREB的磷酸化程度,也沒有改變CaMKIV或者ERK的磷酸化程度。這說明paxilline對(duì)分離細(xì)胞核的CREB與CaMKIV的磷酸化的調(diào)節(jié)作用是特異性地通過BK通道來實(shí)現(xiàn)的,而不是通過可能存在的其它非特異性靶點(diǎn)。
參考文獻(xiàn)
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[4]Channelβ2–4 subunits fail to substitute forβ1 in sensitizing BK channels to lithocholate[J].Anna N.Bukiya,Thirumalini Vaithianathan,Ligia Toro,Alejandro M.Dopico.Biochemical and Biophysical Research Communications.2009(3)
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