背景[1-3]
ANTI-DCR1是一類(lèi)可以特異性結(jié)合ANTI-DCR1的多克隆抗體，主要用于檢測(cè)ANTI-DCR1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中ANTI-DCR1水平。用純化的ANTI-DCR1抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入ANTI-DCR1，再與HRP標(biāo)記的ANTI-DCR1抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的ANTI-DCR1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中ANTI-DCR1濃度。
腫瘤壞死因子受體家族包括TNF-RI、FAS、DR3、DR4、DR5和DR6，在各個(gè)生理系統(tǒng)中調(diào)控細(xì)胞凋亡方面起著重要作用。受體由細(xì)胞因子家族激活，該家族包括TNF、FasL和TRAIL。它們的特點(diǎn)是含有一個(gè)高度保守、富含半胱氨酸的重復(fù)序列的胞外區(qū)和一個(gè)胞內(nèi)保守的約80個(gè)氨基酸的死亡結(jié)構(gòu)域(DD)通過(guò)募集其他含有DD的接頭蛋白（FADD、TRADD、RIP）至死亡誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合體(DISC)，并進(jìn)而導(dǎo)致caspase激活，DD在轉(zhuǎn)導(dǎo)死亡信號(hào)中發(fā)揮重要作用。
凋亡受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)還受誘餌受體家族（DcR1、DcR2和DcR3）控制，這些誘餌受體缺少胞質(zhì)DD并且通過(guò)對(duì)配體競(jìng)爭(zhēng)而抑制死亡受體介導(dǎo)的凋亡。誘餌受體的表達(dá)提供了某些類(lèi)型癌癥調(diào)節(jié)凋亡的機(jī)制并且可能有助于化療敏感性
應(yīng)用[4][5]
用于TRAIL及其受體DR5、DcR1在初發(fā)和復(fù)發(fā)尖銳濕疣患者皮損中的表達(dá)及意義的研究
采用S-P法,即免疫組化過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈酶卵白素法,檢測(cè)30例初發(fā)尖銳濕疣患者皮損組織、30例復(fù)發(fā)尖銳濕疣患者皮損組織中TRAIL蛋白及其受體DR5、DcRl的表達(dá)情況,30例正常皮膚組織作對(duì)照組。免疫組化染色結(jié)果采用半定量法判定,所得數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果1、TRAIL蛋白的免疫陽(yáng)性產(chǎn)物定位于胞膜和胞漿,多呈棕黃色顆粒狀沉著,陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在棘細(xì)胞層。TRAIL蛋白在對(duì)照組、尖銳濕疣初發(fā)組、尖銳濕疣復(fù)發(fā)組的陽(yáng)性表達(dá)率分別為91.67%、83.33%和80.00%,呈遞減趨勢(shì)；其表達(dá)強(qiáng)度在對(duì)照組與尖銳濕疣組間比較,對(duì)照組高于尖銳濕疣初發(fā)組和尖銳濕疣復(fù)發(fā)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),而在尖銳濕疣初發(fā)組和尖銳濕疣復(fù)發(fā)組,二者比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
2、DR5蛋白的免疫陽(yáng)性產(chǎn)物主要定位于細(xì)胞漿,多為淺黃色至棕黃色片狀或彌漫性著色。染色陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在基底細(xì)胞層和棘細(xì)胞層。DR5蛋白在對(duì)照組、尖銳濕疣初發(fā)組、尖銳濕疣復(fù)發(fā)組的陽(yáng)性表達(dá)率分別是53.33%、83.33%和93.33%,呈遞增趨勢(shì)；其表達(dá)強(qiáng)度在對(duì)照組與尖銳濕疣組間比較,對(duì)照組低于尖銳濕疣初發(fā)組和尖銳濕疣復(fù)發(fā)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而在尖銳濕疣初發(fā)組和尖銳濕疣復(fù)發(fā)組,二者比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
3、DcRl蛋白的免疫陽(yáng)性產(chǎn)物定位于胞漿和胞膜,多為淺黃色至棕黃色片狀或彌漫性著色。染色陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在棘細(xì)胞層。DcR1蛋白在對(duì)照組、尖銳濕疣初發(fā)組、尖銳濕疣復(fù)發(fā)組的陽(yáng)性表達(dá)率分別100%、57.50%、40.00%。呈遞減趨勢(shì)。其表達(dá)強(qiáng)度在任兩組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論TRAIL在尖銳濕疣皮損組織中的異常低表達(dá),可能與尖銳濕疣的發(fā)病有關(guān)。
參考文獻(xiàn)
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