背景^[1-3]

小鼠抗EGFR單克隆抗體是一類可以特異性結(jié)合EGFR的單克隆抗體，主要用于檢測EGFR的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實驗。

檢測原理：雙抗體夾心法測定標本中EGFR水平。用純化的Anti-ACTA2抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入EGFR，再與HRP標記的EGFR抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的EGFR呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中EGFR濃度。

EGFR是表皮生長因子受體（HER）家族成員之一。該家族包括HER1（erbB1，EGFR）、HER2（erbB2，NEU）、HER3（erbB3）及HER4（erbB4）。HER家族在細胞生理過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。

EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor）是上皮生長因子（EGF）細胞增殖和信號傳導(dǎo)的受體。EGFR屬于ErbB受體家族的一種，該家族包括EGFR (ErbB-1),HER2/c-neu(ErbB-2),Her 3(ErbB-3) 和Her 4(ErbB-4)。EGFR也被稱作HER1、ErbB1，突變或過表達一般會引發(fā)腫瘤。EGFR是一種糖蛋白，屬于酪氨酸激酶型受體，細胞膜貫通，分子量170KDa。EGFR位于細胞膜表面，靠與配體結(jié)合來激活，包括EGF和TGFα（transforming growth factor α）。激活后，EGFR由單體轉(zhuǎn)化為二聚體，盡管也有證據(jù)表明，激活前也存在二聚體。

應(yīng)用^[4][5]

用于紅景天苷對大氣細顆粒物致小鼠皮膚衰老的干預(yù)作用及初步機制探究

研究發(fā)現(xiàn)PM2.5可促進EGFR表達，紅景天苷(Salidroside)是中藥紅景天的主要有效成分。紅景天苷抗氧化性強,被稱為“天然抗氧化劑”,可清除活性氧。

(1) 探究經(jīng)氣管滴注PM2.5是否影響EGFR表達及誘導(dǎo)小鼠皮膚衰老,同時驗證課題組以往研究結(jié)果可靠性;(2)探究紅景天苷是否干預(yù)上述過程;

(2) 完善PM2.5皮膚毒理學(xué);(4)對長期暴露于PM2.5的特殊人群進行科學(xué)指導(dǎo);(5)為開發(fā)紅景天苷抗皮膚衰老產(chǎn)品提供理論依據(jù)。

方法(1)采集某建筑工地處PM2.5并制成干粉;(2)將40只BALB/c雌性小鼠隨機均分為生理鹽水組及低/中/高劑量PM2.5(1.0、4.8 和 24.0mg/kg)組。經(jīng)氣管滴注液體(1.5ml/kg),1 次/日,連續(xù)5日;

(3) 將40只BALB/c雌性小鼠隨機均分為高劑量PM2.5+生理鹽水組及高劑量PM2.5+低/中/高劑量紅景天苷(10.0、20.0和80.0mg/kg)組。經(jīng)氣管滴注PM2.5后予液體灌胃(10.0ml/kg),1次/日,連續(xù)5日;

(4) 觀察小鼠毛發(fā)及皮膚彈性變化;(5)實驗結(jié)束后24h處死小鼠并采集皮膚組織,實時熒光定量PCR法測定皮膚組織中EGFR mRNA表達量;(6)SPSS及RStudio進行統(tǒng)計學(xué)分析。

結(jié)論(1)經(jīng)氣管滴注PM2.5后,PM2.5可通過促進EGFR表達誘導(dǎo)皮膚衰老,本課題研究結(jié)果與課題組以往結(jié)果一致,證實研究結(jié)論可靠;(2)紅景天苷可通過抑制EGFR表達干預(yù)PM2.5誘導(dǎo)的皮膚衰老過程,開發(fā)紅景天苷抗皮膚衰老產(chǎn)品將具有重要的臨床應(yīng)用價值。

參考文獻

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