背景[1-3]
ATAD5染色體脆弱性相關(guān)基因抗體是可以特異性ATAD5染色體脆弱性相關(guān)基因的一類多克隆抗體。ATAD5屬于AAA ATP酶家族。ATAD5染色體脆弱性相關(guān)基因是RFC（復(fù)制因子C）的一個亞單位的同源物，并已被證明對復(fù)制應(yīng)激反應(yīng)下調(diào)。ATAD5可能在DNA損傷的監(jiān)測和細胞存活或激活凋亡的決定中發(fā)揮作用。ATAD5染色體脆弱性相關(guān)基因主要通過LXXE基序與RB1在G1期相互作用。在生長細胞中與RAD9A相互作用。暴露于DNA復(fù)制抑制劑后，與RAD9A的相互作用降低。Anti-ATAD5抗體，染色體脆弱性相關(guān)基因抗體具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。
先將組織或細胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來。ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA競爭法。
應(yīng)用[4][5]
用于長鏈非編碼RNA NEAT12通過競爭性結(jié)合microRNA-106b-5p調(diào)控ATAD2的表達在甲狀腺乳頭狀癌中發(fā)揮促侵襲和抗凋亡的作用
甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid cancer,PTC）是甲狀腺癌最常見的病理亞型,占所有甲狀腺癌的90%。大多數(shù)PTC在接受手術(shù)及術(shù)后放射性碘治療后預(yù)后良好,5年的生存率超過95%。但仍有一些PTC預(yù)后不良,表現(xiàn)為腫瘤復(fù)發(fā)、廣泛的侵襲轉(zhuǎn)移,10年的生存率低于40%。長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一類長度大于200個核苷酸,不具有編碼蛋白質(zhì)能力的RNA。文獻報道lncRNA參與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展。LncRNA NEAT1最早發(fā)現(xiàn)于注射了日本腦炎病毒和狂犬病病毒的鼠腦中,是核旁斑的重要組成,對于旁斑的形成、維持旁斑結(jié)構(gòu)發(fā)揮重要作用,NEAT1有兩個轉(zhuǎn)錄本NEAT11和NEAT12。
最新的文獻報道NEAT1能在多種腫瘤如肝癌、乳腺癌、非小細胞肺癌、前列腺癌和結(jié)腸癌中發(fā)揮促進腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用。我們之前的研究結(jié)果顯示,在配對的5對PTC組織及癌旁組織lncRNA表達芯片中,NEAT12在癌組織中的表達顯著高于癌旁組織達4.65倍。然而,在PTC中NEAT12的表達、具體功能并不清楚。ATAD2基因,位于人類染色體8q24.13。其編碼的蛋白含有2個AAA（ATPase associated with diverse celluar activities）區(qū)域和一個溴區(qū)結(jié)構(gòu)域（Bromodomain）。AAA區(qū)域通常作為分子伴侶,在細胞內(nèi)發(fā)揮裝配、分解蛋白復(fù)合物的功能;溴區(qū)結(jié)構(gòu)域則參與基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細胞周期的調(diào)控和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。文獻報道ATAD2在肝癌、前列腺癌、肺癌和卵巢癌中顯著高表達,其高表達與較高腫瘤分期、不良組織分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和不良的預(yù)后呈正相關(guān)。
參考文獻
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