背景[1-3]
2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體是可以特異性結(jié)合2-氨基乙硫醇雙加氧酶的單克隆免疫球蛋白??贵w是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。
3-抗體按其反應(yīng)形式分為凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、調(diào)理素、中和抗體、補(bǔ)體結(jié)合抗體等。按抗體產(chǎn)生的來源分為正??贵w(天然抗體),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗體,和免疫抗體如抗微生物的抗體。按反應(yīng)抗原的來源分為異種抗體,異嗜性抗體,同種抗體和自身抗體。按抗原反應(yīng)的凝集狀態(tài)分為完全抗體IgM和不完全抗體IgG等。單克隆抗體技術(shù)在臨床應(yīng)用中為疾病的診斷、治療提供了新手段,作為治療用藥物,單克隆抗體主要應(yīng)用于腫瘤、自身免疫疾病、器官移植排斥及病毒感染等領(lǐng)域。單克隆抗體也可用于腫瘤的導(dǎo)向治療,將針對(duì)某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療或放療藥物連接,利用單克隆抗體的專一性識(shí)別結(jié)合特點(diǎn),將藥物攜帶至靶細(xì)胞并直接將其殺傷。由于單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn),大大促進(jìn)了單克隆抗體檢測(cè)試劑盒的發(fā)展,在病原微生物、腫瘤、免疫細(xì)胞、激素及細(xì)胞因子的檢測(cè)診斷中廣泛應(yīng)用。若將放射性標(biāo)記物與單克隆抗體連接,注入患者體內(nèi)后可進(jìn)行放射免疫顯像,協(xié)助腫瘤的診斷。在親和色譜中單克隆抗體是重要的配體,若將單克隆抗體固定到一個(gè)惰性的固相基質(zhì)上,則可用于特異性抗原分子的高度純化。
應(yīng)用[4][5]
用于Wnt5a啟動(dòng)子甲基化可促進(jìn)亞?;撬岷铣扇毕菽z質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲研究
腦膠質(zhì)瘤(glioma)目前被發(fā)現(xiàn)是原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腦部腫瘤中最常見的腫瘤之一,腦膠質(zhì)瘤的發(fā)病率約占腦部腫瘤的一半以上,高級(jí)別膠質(zhì)瘤的預(yù)后通常較差。以多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)為例,手術(shù)切除后輔以放化療患者的中位數(shù)生存期僅15個(gè)月左右。膠質(zhì)瘤幾乎很少發(fā)生顱外轉(zhuǎn)移,其主要危害源于腫瘤的侵襲性生長(zhǎng),膠質(zhì)瘤WHO分級(jí)越高,往往侵襲性也越強(qiáng)。人膠質(zhì)瘤組織中亞?;撬岷孔兓cWnt5a之間關(guān)系;闡明亞?;撬崾欠裢ㄟ^增強(qiáng)Wnt-5a啟動(dòng)子部位甲基化水平抑制其表達(dá)而間接促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲。
細(xì)胞系為U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞系,經(jīng)RNA干擾技術(shù)構(gòu)建2-氨基乙硫醇雙加氧酶(ADO)基因沉默細(xì)胞系和對(duì)照細(xì)胞系,攜帶嘌呤霉素抗性,液氮條件下保存,ADO的基因沉默程度用RT-PCR技術(shù)鑒定。細(xì)胞系均采用DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng),37°C,5%二氧化碳條件下培養(yǎng)。除試驗(yàn)需要,添加特殊成分以外,均在培養(yǎng)基中加入0.5μg/ml嘌呤霉素做為抗性篩選。
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