背景及概述^[1]

祖師麻為藥名。見《陜西中藥志》。又名大救駕。為瑞香科植物黃瑞香DaphnegiraldiiNitsche的根皮或莖皮。分布山西、陜西、甘肅、青海、四川等地。辛、苦，溫，有小毒。祛風除濕，行瘀止痛。①治風濕痹痛，四肢麻木，跌打損傷，半身不遂，感冒頭痛，胃痛及各種神經(jīng)痛。煎服，3～6g。②痰核流注、疔疽發(fā)背、皮膚癢癥，制成軟膏或硬膏貼患處。制成醑劑外用，可作發(fā)泡劑。孕婦忌服。本品含瑞香素和瑞香苷，還含芫花素、β-谷甾醇等。瑞香素對小鼠有鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用；皂苷部分有抗炎、消腫作用。瑞香素可降低動物血壓，增加冠脈流量，對心肌缺血有保護作用。在體外對金黃色葡萄球菌，大腸、綠膿及福氏痢疾桿菌有抑制作用。祖師麻毒素雖也有中樞抑制作用，但應認為是一種毒性成分。利用色譜分析技術，對祖師麻的甲醇提取物進行活性指導下的分離，發(fā)現(xiàn)了具有神經(jīng)保護作用的化合物蕘花酚。研究顯示，從祖師麻中分離出的蕘花酚可以保護培養(yǎng)的神經(jīng)元，降低H2O2和谷氨酸對其造成的損傷，提高神經(jīng)元存活率。

制備^[2-3]

1）研究顯示，蕘花酚可以保護皮層神經(jīng)元，使受H2O2損傷的皮層神經(jīng)元的還原型谷光甘肽水平和抗氧化酶的活性不會明顯下降。推測蕘花酚的抗氧化損傷作用可能部分是由星形膠質細胞介導的。腦缺血、癲癇、創(chuàng)傷、痙攣和一些神經(jīng)退行性疾病中發(fā)生神經(jīng)元凋亡，都有谷氨酸的神經(jīng)毒性的作用。谷氨酸神經(jīng)毒性的急性表現(xiàn)形式是由Na+和K+進入神經(jīng)元引起細胞腫脹以至死亡。由NMDA/AMPA/海人藻酸等激動劑導致的遲發(fā)性神經(jīng)元退行性病變是Ca2+依賴性的，要求短時暴露在高濃度的Ca2+或長時間暴露在低濃度的Ca2+。還有幾種信號通路也參與了谷氨酸誘導的神經(jīng)元凋亡，例如花生四烯酸以及超氧化物陰離子(O2-·)、羥基(OH·)和H2O2等氧自由基的釋放。這為進一步蕘花酚抗谷氨酸誘導的神經(jīng)元損傷作用的機制提供了思路。現(xiàn)在，蕘花酚細胞內(nèi)和分子水平的作用機制還不完全清楚。但是，結果顯示該化合物對培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元具有顯著地神經(jīng)保護作用，該作用至少部分是通過抗氧化作用實現(xiàn)的。天然產(chǎn)物可以減輕H2O2或谷氨酸導致的神經(jīng)毒性，這可能會為治療氧化損傷導致的神經(jīng)退行性疾病提供一個有用的治療方向。

2）蕘花酚誘導人鼻咽癌CNE細胞(簡稱CNE細胞)凋亡的效應。以不同濃度的蕘花酚作用于CNE細胞，MTT檢測分析蕘花酚對細胞增殖的影響，AnnexinV/PI雙標后流式細胞儀檢測凋亡情況，Westernblot檢測凋亡相關蛋白(caspase-3、caspase-9、PARP、細胞色素C、Bax、Bcl-2)的表達。JC-1染色檢測線粒體膜電位，DCFH-DA染色檢測活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)生成。結果蕘花酚以時間和劑量依賴性方式抑制CNE細胞的增殖，蕘花酚處理誘導CNE細胞發(fā)生明顯凋亡，Bax/Bcl-2比值增加，細胞色素C從線粒體釋放到胞漿，caspase-3和caspase-9活化，PARP發(fā)生剪切。蕘花酚還可誘導CNE細胞線粒體膜電位下降，線粒體膜通透轉運孔(PTP)開放，ROS含量升高。結論蕘花酚可顯著誘導CNE細胞的凋亡，機理與影響線粒體功能密切相關。

主要參考資料

[1] 中醫(yī)大辭典

[2] 蕘花酚對H2O2和興奮性神經(jīng)遞質誘導的大鼠皮層神經(jīng)元細胞損傷的保護作用

[3] 線粒體參與蕘花酚誘導人鼻咽癌CNE細胞凋亡機制