背景及概述^[1]

2，4-二硝基苯肼(DNPH)比色法是測定蛋白質(zhì)羰基含量的經(jīng)典方法，被氧化后的蛋白質(zhì)羰基含量增多，羰基可與2，4-二硝基苯肼反應(yīng)生成2，4-二硝基苯腙，2，4-二硝基苯腙為紅棕色的沉淀，將沉淀用鹽酸胍溶解后即可在分光光度計(jì)上讀取370nm下的吸光度值，從而測定蛋白質(zhì)的羰基含量。2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH是一種化學(xué)物質(zhì)，分子式是C15H14N4O4，可用作醫(yī)藥合成中間體。如果吸入2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH，請將患者移到新鮮空氣處；如果皮膚接觸，應(yīng)脫去污染的衣著，用肥皂水和清水徹底沖洗皮膚，如有不適感，就醫(yī)；如果眼晴接觸，應(yīng)分開眼瞼，用流動清水或生理鹽水沖洗，并立即就醫(yī)；如果食入，立即漱口，禁止催吐，應(yīng)立即就醫(yī)。

DNPH與羰基化合物（例如2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH）的高度選擇性反應(yīng)可檢測衍生的羰基化合物。其次，僅在氨基硝基芳族化合物的正離子化中才能觀察到用于觸發(fā)MS3斷裂的羥基自由基的特征損失，從而可以選擇性檢測和斷裂DNPH衍生的羰基。最后，由于衍生劑如2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH的出現(xiàn)，特定碎片離子的出現(xiàn)將可能的假陽性識別減至最少。有研究用DNPH與羰基化合物（例如2，5-二甲基苯甲醛-2，4-DNPH）表征由特定暴露產(chǎn)生的有毒和遺傳毒性的羰基化合物，并用于監(jiān)測羰基化合物的內(nèi)源性形成，例如衍生自與脂質(zhì)過氧化和氧化應(yīng)激相關(guān)的炎癥過程的羰基化合物。

主要參考資料

[1] A High Resolution/Accurate Mass (HRAM) Data-Dependent MS3 Neutral Loss Screening, Classification, and Relative Quantitation Methodology for Carbonyl Compounds in Saliva