"KYSE-270人食道鱗狀細胞癌復蘇細胞(附STR鑒定報告)

細胞生長：貼壁

細胞傳代方法：１：５傳代

細胞不貼壁、生長緩慢、生長不HAO、甚至死亡的可能原因及解決方法；在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不HAO，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。培養(yǎng)細胞不貼壁，可能原因：胰蛋白酶消化過度、支原體污染、培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）、細胞老化、接種細胞起始濃度太低或太GAO；解決方法：縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度、分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。使用無菌CH3COOH溶液調整pH值或充入無菌CO2、啟用新的保種細胞、調節(jié)佳接種細胞濃度。

CAKI1細胞類似產品：：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞

A-704細胞類似產品：：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞

BCAP37細胞類似產品：：HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞

OCI-AML5細胞類似產品：：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KYSE-270人食道鱗狀細胞癌復蘇細胞(附STR鑒定報告)

在使用胰酶細胞消化液的過程中要別注意避免消化液被細菌污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。貼壁細胞的消化：吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清；加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，根據胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細胞消化時間有所不同）；顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛HAO可以被吹打下來；此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。常用的細胞消化液為胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使細胞間的蛋白質（如細胞外基質）水解，改變細胞間的連接，使組織或細胞片分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗。

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

KYSE-270人食道鱗狀細胞癌復蘇細胞(附STR鑒定報告)

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

WM-115細胞類似產品：：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞

NCI-H2291細胞類似產品：：NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞

NCM356細胞類似產品：：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞

SF-763細胞類似產品：：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞

HOP62細胞類似產品：：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良HAO，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:細胞生長過老，破碎的細胞殘??；血清質量不HAO，反復凍融的結果；配制培養(yǎng)基的pH值偏GAO，不宜細胞生長；配制培養(yǎng)基的水質、容器不合格?？蓱秒x心、過濾的方法去除這些黑點；培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質，多次傳代可以消除。

細胞生長特性：貼壁生長

BEL-7404細胞類似產品：：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞

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HA細胞類似產品：：HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞

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Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞類似產品：：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞

H146細胞類似產品：：NCTC 3960細胞、CWR22-Rv1細胞、HFLS-OA細胞

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Th17細胞類似產品：：MIN-6細胞、SHIN3細胞、Eph4 1424細胞

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