"639V Cell|人膀胱癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：膀胱癌；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

HL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞

PIGI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GTL 16細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞

H-1092細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 863.T細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、H1573細(xì)胞

ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、H1238細(xì)胞

FRTL 5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞、8226/S細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

639V Cell|人膀胱癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞

RIN-m5F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞

GM2132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞

GM06141B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞

RIN-m5F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞

GM2132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞

GM06141B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來(lái)相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過(guò)150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間?？蛇x擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過(guò)低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

MPC-83細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞

SKNEP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞

HUC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞

MPASMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc_03_27細(xì)胞、H-1672細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞

MX-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞

HNE2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞

Be-Wo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞

293AD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞

H1404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞

RKOAS451細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H-2141細(xì)胞、H-820細(xì)胞

639V Cell|人膀胱癌細(xì)胞

BV-173細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞

A9 (Hamprecht)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞

P116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞

THLE-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞

rRTEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞

P3-X63.Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞

MN-60細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Wien133細(xì)胞、H-838細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞

THLE-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞

BRL-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞

Tu212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FOX-NY細(xì)胞、RT4P細(xì)胞、H-1436細(xì)胞

CHL/IU細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞

K422細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N2a細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞

FT-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞

RPMI8226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TERT-RPE1細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞

HN 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞

LS-411N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞

PG-4(S+L-)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞

SW1990細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞

COLO.205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞

CHL/IU細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞

PNT1A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞

NIT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞

OCI-AML2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞

HEK/EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞

MM6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞

JeKo-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞

SW1783細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞

SNU739細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF-PAC1細(xì)胞、149 PT細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞

MPC-83細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞

639V Cell|人膀胱癌細(xì)胞

SUM-52細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞

SUM190細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞

RPMI 1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞

Bowes melanoma cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞

Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293-EBNA1細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞

D341MD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞

U373MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞

WEHI-3B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞

HL7702細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞

Glioma-261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞

Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM04671細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞、CW2細(xì)胞

159PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2122細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞

ACC-M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞

LAN5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞

Hs 839.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞

NCIH838細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞

Sf21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞

"