"B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；雄性；C５７BL/６

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長(zhǎng)良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

IMR-32細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BpRcl細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞

LLC-PK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TR146細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞、ME-180細(xì)胞

JTC-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H460細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞

PC3M-1E8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEMx721.174.T2細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞

SJSA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

MCA 38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞

231-luc細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞

TEV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞

Hs-274-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

MCA 38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞

231-luc細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞

TEV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞

Hs-274-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SW 1783細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEL7404細(xì)胞、P-388細(xì)胞、LTPA細(xì)胞

HS-294細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞

CWR22Rv1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞

Pan02細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞

MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞

Panc-05.04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1353細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞

RBE4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞

PLC-PRF-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞

KYSE-140細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞

293S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞

B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤細(xì)胞

SUD-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞

LN 229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RBMVEC細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞

NCI-SNU-601細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U87 MG細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞、H2591細(xì)胞

Hs-729-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞

D-283MED細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 Ad5細(xì)胞、KMS-18細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞

LN229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞

LN229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞

Hep 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RA細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞

VMCUB-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Huh 7.5.1細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞、NOR10細(xì)胞

Huh-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCM細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞

CF Pac1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞

LC-1 sq細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM/C1細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞

PANC 1005細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEP2D細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞

HCC-2218細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WRL 68細(xì)胞、SCC4細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞

BNL CL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞

Oregon J-111細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞

MUTZ1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞

A-1847細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SL-29細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞

SNU-886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞

NCIH2066細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞

HPF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞

OCI Ly3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞

4T1-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU-812細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞

Hs695T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞

NCTC 3960細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞

0V-1063細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞

MDAMB231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞

HPAF/CD18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞

RKO-AS45-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞

B16-BL6 Cell|小鼠黑色素瘤細(xì)胞

MOLP2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞

NCIH2342細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞

GAK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RSC-364細(xì)胞、C-28I2細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞

H-2170細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞

EFM192A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：X63-Ag8-653細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞

H1395細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞

RGCs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞

Henrietta Lacks cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞

EBTr (NBL-4)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞

Hep 3B2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞

H676細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC38細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、BC-025細(xì)胞

P30OHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞

DCS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞

H-1672細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞

FOXNY細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞

HCC-1428細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞

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