"B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；雄性；C５７BL/６
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞
NCI-H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-1034細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞
Ha Fe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1008細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞
Human Liver-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JiyoyeP-2003細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞
IA-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-19Lu細(xì)胞、H2009細(xì)胞、H-220細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞
MGH-U3 (RN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、BV-173細(xì)胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-1155細(xì)胞、H-2052細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
HUSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-847細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
Lu99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞
GM03320D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞
NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
HEK-293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞
K562/ADP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞
COV362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞
LNCaP C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞
MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞
WPE-int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、BIC細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
Glioma 261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞
MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞
Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞
SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
PANC-08-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
DOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞
Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞
B16-BL6 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞
Keio University-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞
HSC（Human Schwann）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞
1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞
UPCISCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞
RL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC90細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞、C22細(xì)胞
H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
PLB-985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞、KMH2細(xì)胞
Ha Fe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1008細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
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