"HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：皮膚鱗癌；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

BMDC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞

CAL-12T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEL-7404細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、GES1細(xì)胞

Sf21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251_MG細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞

CHP100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、Z310細(xì)胞、HSC6細(xì)胞

LNCaP C4-2B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BNCL2細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

COV-434細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞

MCA-205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞

SW-1417細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞

HBZY1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

COV-434細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞

MCA-205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞

SW-1417細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞

HBZY1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

EFM192C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞

H740細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞

H2227細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞

PC14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞

H378細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 8994細(xì)胞、H-929細(xì)胞、293H細(xì)胞

KTA7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NuTu-19細(xì)胞、M07e細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞

SK ES 01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞

HFF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞

SNT8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞

SUIT2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細(xì)胞

RM-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞

J82COT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞

Helacyton gartleri細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCGC細(xì)胞、VP229細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞

SKML-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞

WEHI231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞

NCI-H1404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：THP-1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞

NCI-H1404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：THP-1細(xì)胞、159PT細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞

RIN-m5F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞

SCC-1395細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mREC細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞

NCIH1734細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞

SJRH-30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞

Hs746T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞

NCI-SNU-C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞

Hs 821.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞

NCI-H1694細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞

H220細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞

SupT1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞

ARPE19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞

PC 61.5.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞

KBM-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞

COLO-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 766T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞

RBL-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞

H-1792細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Detroit 562細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞

Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMC-11細(xì)胞、SW527細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞

RKO-AS45-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞

P3X63Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞

Detroit-562細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞

HPAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞

HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell|人皮膚鱗癌細(xì)胞

NCIH3255細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EAhy 926細(xì)胞、A-375細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞

RBE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞

A549/DDP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞

AML-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞

T HEECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N1E-115細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞、SHG-44細(xì)胞

HS-68細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞

LIXC-002細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞

T 24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB415細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞

H-1869細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞

MIA Paca2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞

HEK293-FT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞

CCC-HSF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞

HIT clone T15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞

IOSE80UBC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞

UO-31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞

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