"HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell:人皮膚鱗癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:皮膚鱗癌;男性 UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞 P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞 C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞 ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell:人皮膚鱗癌細胞系 細胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活;培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 ANA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞 My-La 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞 U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞 M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞 Hs822T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞 細胞生長特性:貼壁 HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell:人皮膚鱗癌細胞系 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞 H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞 NCI-SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 J82 COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞 NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞 C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞 HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell:人皮膚鱗癌細胞系 Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞 COLO 320 HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R1610細胞、E0771細胞、H-498細胞 HS-445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞 639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞 TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞 NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞 VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞 YH-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞 NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞 UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞 PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 BC3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞 NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞 IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞 WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞 HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞 GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞 CaES-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞 QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞 TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞 CAL39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞 NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞 PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞 H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞 HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞 PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞 Madison lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞 X63Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞 HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞 RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞 Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞 FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞 LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞 HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞 A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞 SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞 My-La 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞 NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞 Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞 D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞 KS-1 [Human glioblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7405細胞、BC-021細胞、TE-7細胞 RPMI 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞 MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞 HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma] Cell:人皮膚鱗癌細胞系 A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞 CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞 CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞 ARO 81-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞 Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞 FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞 H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞 SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞 NU-GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞 P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞 CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞 Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細胞、HPDE細胞、OVCAR.8細胞 "
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