"XWLC-05 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：肺癌；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，HAO象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中Zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點(diǎn)狀，GAO倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會(huì)太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良HAO，且觀測(cè)到的運(yùn)動(dòng)物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞生長狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無須殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提GAO細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。

細(xì)胞生長：貼壁

Dakiki細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞

EST81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-1954細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞

HLE-SRA-01/04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc2.03細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞

RINm5F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AMO1細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞

LS 123細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COS-1細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞、A 172細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

XWLC-05 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

HEK-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞

CCD-841-CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞

hFOB1.19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞

MM-1S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

HEK-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞

CCD-841-CoN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞

hFOB1.19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞

MM-1S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

RC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞

Hs695細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞

HPDLF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞

ECC-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞

McArdle RH-7777細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞

DI TNC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞

NCl-H157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞

578T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞

PC14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞

MB49細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOC細(xì)胞、SF-763細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞

XWLC-05 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

HK-2 [Human kidney]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞

H-1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞

IBRS2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞

NCI H548細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞

RKO-AS45-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞

RA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞

RA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞

SW260細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-10細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞

COLO 680N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SVG(P12)細(xì)胞、J45.01細(xì)胞、5637細(xì)胞

CHO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞

CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-358細(xì)胞、SKM-1細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞

H2405細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞

HR1K細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞

RPMI-1846細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞

Tb1.Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CPA47細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、L363細(xì)胞

KP-N-RT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞

SK-ES1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞

LNCaP.FGC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞

P815細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞

COLO 206F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞

MDAMB453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞

PANC403細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFM223細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、H-929細(xì)胞

High 5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞

QGP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞

Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞

FL-83B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW954細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞、MDA175細(xì)胞

373 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞

UMR 106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞

OVHM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞

XWLC-05 Cell|人肺腺癌細(xì)胞

SUM-159PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞

Hs 636 T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞

COLO 320DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞

NCI-H1155細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-146細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞、RSMC細(xì)胞

MV 3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞

MDA.MB.231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞

SF 295細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 453細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞

624-mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、aNK細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞

NB-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞

BEL-7405細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞

RMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞

SK Col 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞

HS-294T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞

SKLU1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、H2085細(xì)胞、CNE2細(xì)胞

Hs-611-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞

RT4-D6-P2T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞

Anip[973]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞

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