"PG13 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：胚胎；成纖維細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時(shí)細(xì)胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時(shí)間。將細(xì)胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個(gè)T２５培養(yǎng)瓶中；２)細(xì)胞密度過低：通常解決方案是提GAO未來(lái)冷凍物種細(xì)胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個(gè)試管來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

MSTO-211H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞

SUDHL-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H345細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞

LS1034細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NRK-52E細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞、WM451細(xì)胞

DHL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KASUMI6細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞

VP 267細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IA-LM細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、LAN5細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

PG13 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

SNK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞

MDCK supertube細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MF2059細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞

PC-3M-1E8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞

Cor L51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

SNK1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞

MDCK supertube細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MF2059細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞

PC-3M-1E8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞

Cor L51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

COLO 16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞

Anip973細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞

HO-1-N-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PGLH7細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞

University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞

L-6TG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞

HEK/293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞

MUTZ1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞

CCLP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞

HITT15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞

F81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞

PG13 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞

PJ34細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞

NCI-SNU-16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞

M210B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞

OVCA5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC-10-05細(xì)胞、ML2細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞

NCIH378細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞

U-138MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞

U-138MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞

Ramos(RA1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞

JROECL 33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞

Co320細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞

Hs940.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞

NCM356細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞

EOMA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞

SkChA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞

RMS13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞

PLA802細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞

P3J.HR1K細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞

RPE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞

U-2OS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞

SKNBE2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PGBE1細(xì)胞、C26細(xì)胞、DHL-2細(xì)胞

OVCA432細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞

HEL-92.1.7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-35 Reuber細(xì)胞、SW620細(xì)胞、H-1836細(xì)胞

U266S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞

WiDr/S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞

3T3L1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CATHa細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞

SW982細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞

H-1930細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞

MDCK2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞

HEMCSS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞

PG13 Cell|逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細(xì)胞

Colo320細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞

MIA Paca2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞

GM04678細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞

AtT20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞

BJ [Human fibroblast]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞

LL/2 (LLC1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞

ROS17/2.8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞

HEC1A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞

Huh-7.5.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞

NHDF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞

HR8348細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞

PAEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞

U-87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞

INS-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BALL1細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞

HS852.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞

AN3CA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞

GM03190細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞

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