"A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細胞

細胞背景資料：皮下結(jié)締組織；自發(fā)永生；雄性；C３H/An

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

COS1細胞類似產(chǎn)品：：Pa14C細胞、H-1373細胞、YT細胞

OEC33細胞類似產(chǎn)品：：ZR-75-1細胞、AZ521細胞、NBL-2細胞

Hca-F細胞類似產(chǎn)品：：ARO81細胞、OCM-1A細胞、HCCLM6細胞

GP2-293細胞類似產(chǎn)品：：AM38細胞、HEK-A細胞、CaES-17細胞

SUD-4細胞類似產(chǎn)品：：OC-316細胞、C 6細胞、L6565細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

SCaBER細胞類似產(chǎn)品：：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞

NCI-H2172細胞類似產(chǎn)品：：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞

PLB985細胞類似產(chǎn)品：：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞

H-II-E-C3細胞類似產(chǎn)品：：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

SCaBER細胞類似產(chǎn)品：：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞

NCI-H2172細胞類似產(chǎn)品：：Pt K1細胞、NPC-TW 039細胞、Detroit 562細胞

PLB985細胞類似產(chǎn)品：：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞

H-II-E-C3細胞類似產(chǎn)品：：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

H-7721細胞類似產(chǎn)品：：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞

Hs863T細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1836細胞、LC-1細胞、RDES-1細胞

CHOS細胞類似產(chǎn)品：：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞

A375-S2細胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞

HEK-2細胞類似產(chǎn)品：：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞

TK-1細胞類似產(chǎn)品：：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞

CHL細胞類似產(chǎn)品：：Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞

NCI-H69C細胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞

NCI H716細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞

BT-325細胞類似產(chǎn)品：：SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞

A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細胞

PG-BE1細胞類似產(chǎn)品：：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞

H-1623細胞類似產(chǎn)品：：HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞

LS-411N細胞類似產(chǎn)品：：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞

NCI-H1876細胞類似產(chǎn)品：：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞

HCC1806細胞類似產(chǎn)品：：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞

NCI.H522細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞

NCI.H522細胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞

Michigan Cancer Foundation-10A細胞類似產(chǎn)品：：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞

NCC-IT細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞

S37細胞類似產(chǎn)品：：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞

Kit-225細胞類似產(chǎn)品：：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞

HGE細胞類似產(chǎn)品：：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞

P3/NSI/1-AG4-1細胞類似產(chǎn)品：：SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞

KOSC2細胞類似產(chǎn)品：：TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞

Pro-5WgaRI3C細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞

HuNS1細胞類似產(chǎn)品：：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞

SKMEL-2細胞類似產(chǎn)品：：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞

CHP-126細胞類似產(chǎn)品：：OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞

S.B.細胞類似產(chǎn)品：：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞

NIE 115細胞類似產(chǎn)品：：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞

Pt K2 (NBL-5)細胞類似產(chǎn)品：：NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞

SG231細胞類似產(chǎn)品：：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞

LNCaP clone FGC細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞

Nb2a細胞類似產(chǎn)品：：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞

BaF3細胞類似產(chǎn)品：：ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞

SK-GT-2細胞類似產(chǎn)品：：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞

NKT細胞類似產(chǎn)品：：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞

VMCUB1細胞類似產(chǎn)品：：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞

H-1385細胞類似產(chǎn)品：：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞

A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細胞

NCI-H1876細胞類似產(chǎn)品：：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞

H-2066細胞類似產(chǎn)品：：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞

NCI-H187細胞類似產(chǎn)品：：RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞

ME-180細胞類似產(chǎn)品：：B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞

MGH-UI細胞類似產(chǎn)品：：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞

H-2122細胞類似產(chǎn)品：：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞

B16 BL6細胞類似產(chǎn)品：：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞

KTA7細胞類似產(chǎn)品：：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞

NOR-10細胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞

Hs-281-T細胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞

EoL-1-cell細胞類似產(chǎn)品：：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞

OVCAR-4細胞類似產(chǎn)品：：WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞

Ly1細胞類似產(chǎn)品：：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞

D-341 Med細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞

WERI細胞類似產(chǎn)品：：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞

LK-2細胞類似產(chǎn)品：：RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞

NCTC1469細胞類似產(chǎn)品：：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞

"