1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡稱 L Wnt-3A
細(xì)胞別稱 L-Wnt-3A; L-Wnt3A; LWnt3A; LWnt-3A
細(xì)胞背景描述 L Wnt-3A細(xì)胞是由L-M(TK-)細(xì)胞用Wnt-3A表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選出的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白,Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。L Wnt-3A細(xì)胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白,L Wnt-3A細(xì)胞是目前生產(chǎn)Wnt-3A條件培養(yǎng)基的來源。由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子,對于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實驗有必要用其來源細(xì)胞株作對照。
供體年齡 雄性,100日齡
組織來源 組織:皮下結(jié)締組織;疏松結(jié)締組織及脂肪;品系:C3H/An
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 DMEM(PM150210)+0.4mg/ml G418(PB180125)+10%
FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時間 2~3分鐘
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。