PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱：超廣譜內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌PCR試劑盒
英文名稱：ESBLKlebsiella pneumoniaeβPCR
編號： FSP1642
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 產(chǎn)品僅供科研從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器推薦的流程進行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時，吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時的吸收光譜在 500nm，發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標準曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
APOD載脂蛋白D抗體特價促銷anti- FOXC2 antibody人免疫球蛋白A標準溶液軸周蛋白PRX抗體

EGFL8表皮生長因子樣蛋白8抗體特價促銷anti- FOXD4 antibody人血液免疫球蛋白E（IgE）免疫比濁法定量檢測試劑盒腸道71型/手足口病抗體

EFR3AEFR3A蛋白抗體特價促銷anti- FOXD4L6 antibody人免疫球蛋白E標準溶液蛋白質(zhì)磷酸酶2B抗體 PP2A β PP2A-β

E3 ubiquitin ligase/RNF218E3泛素連接酶抗體特價促銷anti- FOXE3 antibody人血液載脂蛋白A1（APOLIPOPROTEIN A1）免疫比濁法定量檢測試劑盒cGMP依賴性蛋白激酶1抗體

DUX3DUX3蛋白抗體特價促銷anti- FOXG1 antibody人載脂蛋白A1標準溶液胞粘蛋白1抗體抗體

DSU/MREGMREG蛋白抗體特價促銷anti- FOXH1-Specific antibody人血液載脂蛋白B（APOLIPOPROTEIN B）免疫比濁法定量檢測試劑盒多形性腺瘤基因樣蛋白2抗體　

CGI62/C8orf708號染色體開放閱讀框70抗體特價促銷anti- FOXJ3 antibody人載脂蛋白B標準溶液Pantophysin抗體

DENND2CMAP激酶激活死亡域蛋白2C抗體特價促銷anti- FOXJ3 antibody人血液前白蛋白（prealbumin；PA）免疫比濁法定量檢測試劑盒磷酸化心臟磷蛋白抗體
超廣譜內(nèi)酰胺酶肺炎克雷伯菌PCR試劑盒Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..TLK2  絲氨酸/蘇氨酸激酶TLK2抗體渥曼青霉素伐他汀鈉進口/國產(chǎn)HSD17B6  17-β-羥脫氫酶6抗體含量：含量測定（HPLC）

Homo sapiens, humanANKRD28  錨蛋白重復(fù)域28抗體渥曼青霉素對氨酚進口/國產(chǎn)TFF1/BCEI  癌雌激誘導(dǎo)蛋白抗體含量： TLC檢查

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..SIPA1L2  信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1樣蛋白2抗體瑞士色素鹽酸賽利洛爾進口/國產(chǎn)Galectin 1  半糖凝集1抗體含量：含量測定（UV）

Homo sapiens, humanDUSP7  雙特異性蛋白磷酸酶7抗體漢黃芩素阿卡波糖進口/國產(chǎn)CENPB  著絲粒蛋白B抗體含量：含量測定（HPLC）

driedPPM1B  蛋白質(zhì)磷酸酶1B抗體（PP2Cβ）木糖醇鹽酸米安色林進口/國產(chǎn)STMN3  原癌因18家族STMN3蛋白抗體含量：UV法含量測定

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..PPM1G  蛋白質(zhì)磷酸酶1G抗體（PP2Cγ）木糖醇維庫溴銨進口/國產(chǎn)NPHS2/Podocin  小球裂孔膜蛋白PDCN抗體含量：含量測定（HPLC）

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..PPP2R1A  蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1A抗體木聚糖酶富馬酸喹平進口/國產(chǎn)Cofilin  肌動蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體含量：含量測定（UV）

Homo sapiens, humanPPP2R1B  蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1B抗體木聚糖酶汀進口/國產(chǎn)EphA5/Eph receptor A5  酪氨酸蛋白激酶A5受體抗體含量：含量測定（HPLC）
儲存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。