抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體
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英文名稱
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Anti-BIG1/ARFGEF1
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-BIG1/ARFGEF1
中文名稱 ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體
別 名 ADPribosylation factor guanine nucleotide exchange factor 1(brefeldin A inhibited); ARFGEF1; ARFGEP1; Brefeldin A inhibited GEP 1; Brefeldin A inhibited guanine nucleotide exchange protein 1; p200 ARF GEP1; p200 ARF guanine nucleotide exchange factor; BIG1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 G蛋白偶聯(lián)受體 表觀遺傳學(xué) G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 209kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BIG1/ARFGEF1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
維生素B6,哆 英文名稱(EN):AcetylβMethylcholine Bromide (≥99%)規(guī)格(SP):5G
維生素C(標(biāo)準品) 英文名稱(EN):Levulinic acid (98%)規(guī)格(SP):50G
維生素C鈉(標(biāo)準品) 英文名稱(EN):Luciferase from Photinus pyralis規(guī)格(SP):1MG原裝
維生素C棕櫚/L抗壞血棕櫚 英文名稱(EN):Chromium III chloride hexahydrate規(guī)格(SP):100G
維生素D2(標(biāo)準品) 英文名稱(EN):Dextran sulfate sodium,Dextralip 50規(guī)格(SP):500MG
維生素D3 βD葡萄糖苷 英文名稱(EN):Tannic acid規(guī)格(SP):100G
維生素E 英文名稱(EN):Propylene Glycol (≥99.5%,USP)規(guī)格(SP):100ML
維生素E琥珀;Dα生育琥珀 英文名稱(EN):2Hydroxynaphthalene (99%)規(guī)格(SP):50G
維生素K1 2,3環(huán)化物 英文名稱(EN):Sodium diethyldithiocarbamate trihydrate規(guī)格(SP):25G
維生素K1d7 英文名稱(EN):4Nitrophenyl palmitate規(guī)格(SP):1G
維生素K3,醌 英文名稱(EN):Arachidonic acid (≥85%)規(guī)格(SP):100MG
維生素K3,醌(標(biāo)準品) 英文名稱(EN):Pyridinealdoxime methochloride (99%)規(guī)格(SP):5G
維替泊芬 英文名稱(EN):LBAPA (≥99%,TLC)規(guī)格(SP):25MG原裝
偽伐地非 英文名稱(EN):Tetraethyl orthosilicate,98%規(guī)格(SP):250ML
偽原薯蕷皂苷 英文名稱(EN):Dehydroandrographolide (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
萎銹靈(標(biāo)準品) 英文名稱(EN):Quercetin7glucoside (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
衛(wèi)茅(>99%,分子生物學(xué)級) 英文名稱(EN):Diosmetin7glucoside (≥98%,HPLC)規(guī)格(SP):20MG
胃蛋白(1:12000) 英文名稱(EN):Sodium sulfite (≥98.0%,ACS)規(guī)格(SP):250G
G氨基丁酸受體α3抗體10-Deacetylyunnanxane中文名:別名:分子式:C29H44O8
GEN1蛋白抗體Isoleojaponin中文名:別名:分子式:C20H26O3
甘丙肽受體1抗體10,11-Dihydro-24-hydroxyaflavinine中文名:別名:分子式:C28H41NO2
G蛋白偶聯(lián)受體GPR113蛋白抗體Taxcultine中文名:別名:Taxol D分子式:C44H53NO14
G2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體Cabazitaxel intermediate中文名:卡巴他賽中間體別名:卡巴他賽有關(guān)物質(zhì)分子式:C51H59NO15
ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體 Clostridium tyrobutyricum種屬:Clostridium tyrobutyricum
提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)丁酸
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:生孢梭菌培養(yǎng)基:胰蛋白胨 10.0克 牛肉膏 10.0克 葡萄糖 5.0克 氯化鈉 5.0克 酵母膏 3.0克 醋酸鈉 3.0克 可溶性淀粉 1.0克 半胱氨酸 0.5克 瓊脂 0.5克 pH6.8±0.2,蒸餾水 1000ml 強化梭酸培養(yǎng)基:,F(xiàn)T
傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件:37℃,厭氧,
存儲條件:2-8℃冷藏酪丁酸梭菌
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