抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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β細(xì)胞素抗體
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英文名稱
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Anti-Beta cellulin
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-Beta cellulin
中文名稱 β細(xì)胞素抗體
別 名 Beta cellulin; Beta cellulin precursor; BTC; BTC_HUMAN; OTTHUMP00000160600; OTTHUMP00000219057; Probetacellulin.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和激素 淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 9/17kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Betacellulin
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是β細(xì)胞素抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
維多利亞藍(lán)B,性藍(lán) 26 英文名稱(EN):UDPG, Uridine 5′Diphosphoglucose Dis...規(guī)格(SP):1G
維 英文名稱(EN):5Hydroxy,4naphthoquinone (97%)規(guī)格(SP):1G
維庫(kù)溴銨 英文名稱(EN):Sodium diethyldithiocarbamate trihydrate規(guī)格(SP):5G
維庫(kù)溴銨(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):HippurylLphenylalanine規(guī)格(SP):500MG
維拉佐 英文名稱(EN):LLeucine βnaphthylamide規(guī)格(SP):1G
維蘭特羅 英文名稱(EN):1,8Dihydroxyanthraquinone (96%)規(guī)格(SP):25G
維羅,RG7204 英文名稱(EN):Strychnine nitrate salt規(guī)格(SP):25G
維莫德吉(GDC0449) 英文名稱(EN):Copper(II) Sulfate Pentahydrate (≥98%)規(guī)格(SP):250G
維生素 D3 ((膽骨化) 英文名稱(EN):Methoxyamine hydrochloride (≥98.0%)規(guī)格(SP):5G
維生素 E, 生育 英文名稱(EN):Quinacrine Dihydrochloride (≥90%)規(guī)格(SP):5G
維生素 K1 英文名稱(EN):Strychnine hydrochloride規(guī)格(SP):25G
維生素A醋(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):Indomethacin (≥99%)規(guī)格(SP):5G
維生素B1 英文名稱(EN):2(4Isobutylphenyl)propionic acid (99%)規(guī)格(SP):1G
維生素B1(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):Trimethoprim (≥98%,TLC)規(guī)格(SP):1G
維生素B12(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):1Octanol規(guī)格(SP):1ML
維生素B2(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):Potassium hexacyanoferrate (99%)規(guī)格(SP):100G
維生素B3(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):SelenoDLmethionine (≥99%,TLC)規(guī)格(SP):25MG
維生素B6(標(biāo)準(zhǔn)品) 英文名稱(EN):2,2Diphenylpicrylhydrazyl規(guī)格(SP):250MG
G氨基丁酸B型受體2抗體Spiratisanin A中文名:繡線菊阿替生素A別名:分子式:C29H40O3
谷氨酸脫羧酶67抗體Siegeskaurolic acid中文名:別名:(16R)-17-Hydroxy-ent-kauran-19-oic acid分子式:C20H32O3
生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45抗體Pseudolaric acid B中文名:土槿皮乙酸別名:分子式:C23H28O8
腦糖原磷酸化酶抗體6β-Hydroxyhispanone中文名:別名:6β-Hydroxy-15,16-epoxylabda-8,13(16),14-trien-7-one分子式:C20H28O3
G氨基丁酸受體3抗體Sugeroside中文名:別名:Sugereoside; Abbeokutone 17-O-glucoside分子式:C26H42O8
β細(xì)胞素抗體 Pediococcus acidilactici Lindner種屬:Pediococcus acidilactici Lindner
提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:乳酸菌培養(yǎng)基: Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (牛肉膏) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件:30℃,好氧
存儲(chǔ)條件:2-8℃冷藏乳酸片球菌