抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-DIP13B/APPL2
中文名稱 DIP13β抗體
別 名 Adapter protein containing PH domain; Adapter protein containing PH domain PTB domain and leucine zipper motif 2; adaptor protein, phosphotyrosine interaction, PH domain and leucine zipper containing 2; APLP2; Appl2; DCC interacting protein 13 beta; DCC-interacting protein 13-beta; Dip13 beta; Dip13-beta; DP13B_HUMAN; PTB domain and leucine zipper motif 2.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Fruit Fly
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞膜受體 G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 75kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DIP13B/APPL2
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
下列是DIP13β抗體 的相關熱銷產(chǎn)品:
去異波爾定;去異波爾定英文名稱:To a different Pohl Pohl; to methyl isobutyl保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支環(huán)指蛋白211一抗
石斛;石槲英文名稱:Shi Hujian; Shi Mistletoe Alkali保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支RET指蛋白樣2/3一抗
白術內(nèi)I;蒼術內(nèi)I英文名稱:Atractylenolide I; Atractylodes lactone I保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支環(huán)指蛋白210一抗
白術內(nèi)II;蒼術內(nèi)II英文名稱:Atractylenolide II; Atractylodes lactone II保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支RFESD蛋白一抗
白術內(nèi)III;蒼術內(nèi)III英文名稱:Atractylenolide III; Atractylodes lactone III保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支胰島細胞再生因子β一抗
甘油溶液英文名稱:Nitroglycerin solution保存:20℃,避光規(guī)格:1.0mlRFTN2蛋白一抗
內(nèi)酰英文名稱:Caprolactam保存:20℃,避光規(guī)格:50mg核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A一抗
環(huán)酰英文名稱:Cyclophosphamide保存:20℃,避光規(guī)格:100mg環(huán)指蛋白213
環(huán)英文名稱:Cyclohexylamine保存:20℃,避光規(guī)格:100mgRap2A一抗
環(huán)英文名稱:Ciclopirox olamine保存:20℃,避光規(guī)格:50mg受體表達蛋白5/息肉相關蛋白一抗
果糖英文名稱:Fructose保存:20℃,避光規(guī)格:100mg胰島β細胞生長因子Reg IIIγ一抗
富馬替芬英文名稱:Ketotifen fumarate保存:20℃,避光規(guī)格:50mg染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1一抗
富馬馬斯汀英文名稱:Fumaric acid chloride Mastin保存:20℃,避光規(guī)格:50mg胰島β細胞生長因子Reg IIIα 一抗
醋醌英文名稱:Menadiol diacetate保存:20℃,避光規(guī)格:50mg視網(wǎng)膜色素變性蛋白1一抗
醋去氧皮質英文名稱:Desoxycorticosterone acetate保存:20℃,避光規(guī)格:30mg視網(wǎng)膜感光細胞外節(jié)膜蛋白1一抗
半乳糖英文名稱:Galactose保存:20℃,避光規(guī)格:300mgDNA修復蛋白Rad50一抗
貝諾英文名稱:Benorilate保存:20℃,避光規(guī)格:100mgRecQ解旋酶樣蛋白5一抗
12號染色體開放閱讀框42抗體5-O-Methylvisammioside中文名:5-O-甲基維斯阿米醇苷別名:分子式:C22H28O10
11號染色體開放閱讀框46抗體Sec-O-glucosylhamaudol中文名:亥茅酚苷別名:分子式:C21H26O10
11號染色體開放閱讀框67抗體Echinacoside中文名:松果菊苷別名:分子式:C35H46O20
11號染色體開放閱讀框77抗體Aristolochic acid I中文名:馬兜鈴酸I別名:Aristolochic acid A; 馬兜鈴酸A分子式:C17H11NO7
11號染色體開放閱讀框16抗體Forsythiaside中文名:連翹酯苷別名:Forsythoside A; 連翹酯苷A分子式:C29H36O15
DIP13β抗體 EnterobacteragglomeransEwingandFife種屬:EnterobacteragglomeransEwingandFife
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長條件:37℃成團腸桿菌